兔膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞骨架的觀察與研究.pdf

1、目的：觀察骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis，OA)軟骨細(xì)胞骨架的形態(tài)及定量檢測骨架各蛋白成分含量的變化，探討細(xì)胞骨架在骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制中的作用 方法：3月齡雄性新西蘭白兔8只，隨機(jī)分為2組，每組4只，實驗組行前交叉韌帶切斷術(shù)(ACLT)，造成骨關(guān)節(jié)炎模型，對照組切開關(guān)節(jié)囊，但不行ACIT。20周后處死兩組動物，取左膝做大體標(biāo)本觀察，HE染色。右膝在無菌條件下取股骨滑車和股骨內(nèi)髁的全層軟骨，消化分離軟骨細(xì)胞并進(jìn)行單層培養(yǎng)，倒

2、置顯微鏡下觀察細(xì)胞匯合至80％左右時進(jìn)行固定，利用免疫熒光抗體分別對各代軟骨CSK蛋白成分肌動蛋白、波形蛋白、微管蛋白和紐蛋白進(jìn)行熒光染色后，用激光共聚焦掃描顯微鏡對軟骨細(xì)胞骨架進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察及熒光強(qiáng)度定量檢測。 結(jié)果：手術(shù)后20周OA關(guān)節(jié)軟骨明顯退變，大體評分明顯高于對照組(P＜0.05)，實驗組中間纖維、微管、紐蛋白形態(tài)及分布發(fā)生明顯改變，熒光定量檢測顯示實驗組中間纖維、微管和紐蛋白均低于正常組(P＜0.001)，微絲形態(tài)和