甘蔗及其根際土壤固氮菌的分離和特性研究.pdf

1、 學(xué)校代碼：10564 學(xué) 號(hào)：2013204004 分 類 號(hào)：Q933 密 級(jí)： 碩 士 學(xué) 位 論 文 甘蔗及其根際土壤固氮菌的分離和特性研究 張洪彬 指 導(dǎo) 教 指 導(dǎo) 教 師： 譚志遠(yuǎn) 教授 學(xué) 院 名 學(xué) 院 名 稱： 農(nóng)學(xué)院 專 業(yè) 名 專 業(yè) 名 稱： 遺傳學(xué) 答辯委員會(huì)主席： 答辯委員會(huì)主席： 年 海 教授 中國(guó)· 廣州 2016 年 6 月 I 摘 要 本研究采用無(wú)氮選擇培養(yǎng)基從甘蔗及其

2、根際土壤中篩選內(nèi)生固氮菌和自生固氮菌。通過(guò)乙炔還原法測(cè)固氮酶活性；根據(jù) 16S rDNA 序列分析確定其系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系；采用 Salkowski 比色法測(cè)其產(chǎn)生長(zhǎng)素能力，Biolog 板測(cè)定碳源利用情況，使用透明圈法定性測(cè)溶磷解鉀能力； 對(duì)固氮活性較高兼具備良好生理生化特性的菌株采用活菌計(jì)數(shù)法進(jìn)行了培養(yǎng)條件優(yōu)化； 并在每一屬中選一個(gè)代表菌株采用盆栽方式進(jìn)行水稻和玉米幼苗促生特性研究。主要得出以下研究結(jié)果： 研究發(fā)現(xiàn)分離的 35 株固氮菌中

3、，g1 固氮酶活性最高，達(dá) 1111.36 nmol/(mL·h)，g7、g6、g116、g98 固氮酶活性比較高，超過(guò) 500 nmol/(mL·h)，t108 固氮酶活性最低為 75.37 nmol/(mL·h）。單從固氮酶活性來(lái)看，分離的具有高效固氮能力的優(yōu)良菌株較多。 各菌株分別屬于節(jié)細(xì)菌屬、芽孢桿菌屬、克雷伯氏菌屬、草螺菌屬、鞘氨醇單胞菌屬、解鳥(niǎo)氨酸拉烏爾菌屬、泛菌屬、勞爾特氏菌屬。9 個(gè)屬中分離

4、到菌株最多的屬是克雷伯氏菌屬 14 株和芽孢桿菌屬 8 株。其中克雷伯氏菌屬菌株固氮酶活性最高，芽孢桿菌屬菌株固氮酶活性最低。 對(duì)固氮菌進(jìn)行了生理生化特性研究，獲得了 9 株具有較好的產(chǎn)生生長(zhǎng)素能力的固氮菌， 達(dá)到 20.03~384.13mg/L。 菌株 b310、 t134、 g1、 g7、 g172 具有較強(qiáng)的溶磷能力。 對(duì)所有菌株進(jìn)行了液體培養(yǎng)，測(cè)得 t98、g1、g7、g172、g12、g24 活菌數(shù)最高，以 g24、g12、

5、t98 為代表進(jìn)行培養(yǎng)條件優(yōu)化，g24、g12、t98 的活菌數(shù)分別達(dá)到 8.8×109 CFU/mL，6.1×109 CFU/mL，1.25×1010 CFU/mL。 研究固氮菌對(duì)水稻和玉米幼苗生長(zhǎng)的影響結(jié)果表明，8 個(gè)代表菌株對(duì)水稻和玉米的株高、干重、鮮重、發(fā)芽率等都有顯著影響。 微生物肥料中有益微生物的種類，活菌數(shù)量直接影響其肥效的好壞。本研究豐富了固氮菌種質(zhì)資源，為微生物肥料生產(chǎn)提供了優(yōu)良的功能菌株