落葉松抗旱相關基因分子標記的篩選與克隆.pdf

1、落葉松是具有重要經(jīng)濟和生態(tài)價值的樹種，它多分布于寒冷和高山地帶，具有較高的抗旱能力。目前，國內(nèi)外對落葉松的研究主要集中在分子系統(tǒng)學方面。已報道的基因數(shù)相對較少，大部分為ribosomal RNA基因序列。因此通過分子生物學手段研究落葉松抗旱相關基因及分子標記具有重要的理論意義和應用價值。
　　 本論文主要從兩方面進行了研究：
　　 1.落葉松高生根能力相關基因的分子標記研究
　　 本研究以生根率為依據(jù)，分別選取日

2、本落葉松(Larix kaempferi)×長白落葉松(Larix olgensis)四組雜交組合(日永85×長白11，日永85×長混，日永85×長白4C，日永85×長白27)為試材，結合集群分離分析法(BSA)，隨機引物擴增多態(tài)性DNA(RAPD)技術，特征序列擴增區(qū)域(SCAR)技術及簡單序列重復區(qū)間擴增多態(tài)性(ISSR)分子標記，首次對落葉松高生根能力相關基因分子標記進行研究。利用368個RAPD引物，篩選到一個高生根能力相關基因

3、的分子標記S356445，并成功的將該標記轉(zhuǎn)換為SCAR標記—HRL445。同時利用30個ISSR技術篩選到4個新標記，分別為：LARI-1，LARI-2，LARI-3，LARl-4。本研究為利用分子標記技術輔助高生根能力落葉松育種，加快育種進程提供了新的技術途徑。
　　 2.落葉松脫水素基因同源序列的克隆
　　 鑒于脫水素在干旱過程中對植物起到重要的的保護作用，本研究采用同源克隆的策略設計脫水素基因兼并引物，應用PCR