小麥光溫敏雄性不育系337S不育相關(guān)基因的遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、小麥337S不育系是對長日高溫、短日低溫均敏感的兩極光溫敏小麥雄性不育系，具有不育性穩(wěn)定、制種區(qū)域廣之特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)室早期以337S光溫敏雄性不育系在短日低溫不育環(huán)境條件及正?？捎h(huán)境條件下的花藥為材料，采用數(shù)字基因表達(dá)譜技術(shù)對其進(jìn)行RNA-Seq測序分析，獲得了大量與小麥生殖發(fā)育相關(guān)的差異基因，并對其中差異表達(dá)顯著的關(guān)鍵基因進(jìn)行了分子克隆。同時(shí)利用Gateway技術(shù)構(gòu)建了候選基因TaMS337S-1和TaMS337S-2的超量表達(dá)載體，

2、通過基因槍和農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)化不同小麥品種進(jìn)行功能驗(yàn)證，探究TaMS337S-1和TaMS337S-2基因在小麥生長過程中的主要作用，并為337S光溫敏不育系短日低溫?cái)∮肿訖C(jī)理的研究提供線索?，F(xiàn)已基本完成了這兩個(gè)基因的遺傳轉(zhuǎn)化工作，主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:以華麥2152和華麥2566為受體通過基因槍轟擊法轉(zhuǎn)化TaMS337S-1基因，沒有得到轉(zhuǎn)基因植株。以華麥2152、華麥2566、鄭麥9023、隴春23、科農(nóng)199和Bob Whi

3、te幼胚為受體材料，通過基因槍轟擊轉(zhuǎn)化TaMS337S-2基因得到再生小麥51株，分別為4株華麥2566，41株隴春23，1株Bob White。PCR初步檢測后顯示2株隴春23為陽性植株，其余均為陰性再生苗。以華麥2152、華麥2566、隴春23和科農(nóng)199為受體材料，利用農(nóng)桿菌侵染法轉(zhuǎn)化TaMS337S-1基因得到再生植株7株，分別為3株華麥2566，4株隴春23。PCR結(jié)果顯示有2株華麥2566為轉(zhuǎn)基因陽性植株，其表型為花絲外露、