高通量測序技術(shù)在稽留流產(chǎn)遺傳學分析中的應用.pdf

1、目的：通過高通量測序技術(shù)對稽留流產(chǎn)絨毛的染色體進行檢測，通過分析染色體數(shù)目變異和染色體片段拷貝數(shù)變異，研究胚胎染色體異常與稽留流產(chǎn)之間的關(guān)系，探討高通量測序技術(shù)在稽留流產(chǎn)遺傳檢測中的應用。通過對稽留流產(chǎn)的夫妻雙方進行遺傳檢測，判斷胚胎染色體異常的來源和遺傳方式，為再次妊娠提供可靠的實驗室依據(jù)和遺傳咨詢指導。
　　方法：對6例稽留流產(chǎn)患者行清宮術(shù)，收集絨毛組織，同時采集稽留流產(chǎn)夫妻的外周血。利用核酸提取試劑盒提取基因組DNA，超聲波

2、破碎后進行文庫制備，最后在Hiseq2000測序儀上完成高通量測序。經(jīng)生物信息學分析，統(tǒng)計染色體異常的類型，探討稽留流產(chǎn)的發(fā)生方式。通過將檢測到的拷貝數(shù)變異與國際基因組變異數(shù)據(jù)庫(Database of Genomic Variants)進行對比，排除常見的多態(tài)性CNV，再與DECPHER、UCSC、OMIM數(shù)據(jù)庫進行對比，結(jié)合已有的文獻報道，分析其拷貝數(shù)變異是否具有致病性。
　　結(jié)果：6例家系樣本全部檢測成功。6例稽留流產(chǎn)絨毛樣

3、本中，染色體異常標本5例，分別為2、3、7、8、15三體型染色體，均為新發(fā)突變。同時，檢測得到CV2287家系父親、CV2293家系母親和CV2300家系父母的染色體存在微缺失/微重復，經(jīng)査閱DGV數(shù)據(jù)庫，都顯示為正常人攜帶的CNV變異。1例稽留流產(chǎn)（CV2295)，未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目變化，但存在兩個微缺失，其中一個微缺失遺傳自母親，另一微缺失為正常人攜帶的CNV變異，未檢出致病原因，結(jié)果為陰性。
　　結(jié)論：染色體異常是早期稽留流產(chǎn)