高響應(yīng)性磁性微球的制備及其生物分離應(yīng)用.pdf

1、隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，科學(xué)研究領(lǐng)域及生產(chǎn)領(lǐng)域?qū)焖俦憬莸姆蛛x方法產(chǎn)生了巨大的需求。磁分離技術(shù)因具有高效、快速、非玷污、集分離及富集于一體等諸多優(yōu)點(diǎn)而廣泛應(yīng)用于免疫分析、核酸提取、基因測(cè)序、細(xì)胞分離、固定化酶、手性分離等生命科學(xué)研究的重要領(lǐng)域。生物磁分離技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)是微型化、平行化和自動(dòng)化，其核心問(wèn)題在于制備出粒徑大小均勻、分散性好、磁性強(qiáng)和制備簡(jiǎn)便的磁性微球，以保證生物分離過(guò)程的高效性、重現(xiàn)性和可控性?；谏鲜霰尘?，本論文旨在探索高

2、響應(yīng)性磁性微球的制備方法及其在生物分離中的應(yīng)用。研究工作主要分為三個(gè)部分：(1)高響應(yīng)性磁性微球的制備及表面官能團(tuán)修飾；(2)磁性微球固定化脂肪酶及拆分β-氨基酸；(3)磁性微球提取中藥材DNA。
　　 采用溶劑熱法合成了Fe3O4磁性微球，并對(duì)成球機(jī)理和控制因素進(jìn)行了一系列的研究。采用溶膠-凝膠法在磁性微球表面進(jìn)行官能團(tuán)修飾，進(jìn)行了FT-IR、XRD、VSM、TEM、HR-TEM等表征，該微球具有粒徑小、磁性強(qiáng)、分散性好等優(yōu)點(diǎn)

3、，為快速分離奠定了基礎(chǔ)，且制備簡(jiǎn)便，有利于實(shí)現(xiàn)大規(guī)模的生產(chǎn)。
　　 對(duì)磁性微球進(jìn)行了兩類(lèi)應(yīng)用研究，一是通過(guò)共價(jià)鍵合、引入空間間隔臂的共價(jià)鍵合、金屬離子螯合這三種不同的方法，將具有手性拆分特性的脂肪酶(Pseudomonas cepacia lipase)固定在其表面，制成磁性微球?yàn)檩d體的固定化酶。用該固定化酶拆分β-氨基酸消旋體，可得到光學(xué)純的異構(gòu)體。針對(duì)這三種不同的方法，分別摸索了最佳的固定化條件，并對(duì)三種方法制備的同定化酶進(jìn)

4、行了基本酶學(xué)性質(zhì)和拆分性能的比較。通過(guò)酶固定化的方法及條件摸索，對(duì)廣義的蛋白及細(xì)胞固定化工作具有重要的參考價(jià)值。
　　 隨著中藥現(xiàn)代化的深入開(kāi)展，中藥材的質(zhì)量控制面臨著更高層次的挑戰(zhàn)，基于核酸的分子生物學(xué)鑒定對(duì)中藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣鑒定具有重要的指導(dǎo)意義。中藥材的成分復(fù)雜，加工處理導(dǎo)致核酸降解，因此建立中藥材中核酸提取方法，以獲得滿(mǎn)足純度、濃度和完整性要求的核酸模板，是關(guān)系到分子生物學(xué)鑒定成敗的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)以磁性微球?yàn)槲絼闹兴幉闹?/p>