體外誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向平滑肌細(xì)胞分化的研究.pdf

1、目的: 探討在體外誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向平滑肌細(xì)胞分化的的有效方法，以便為后續(xù)實驗工作提供穩(wěn)定的種子細(xì)胞來源。 方法: 以密度梯度離心法白兔骨髓液獲取骨髓間充質(zhì)千細(xì)胞進行原代及傳代培養(yǎng)，觀察其形態(tài)學(xué)變化并鑒定。以5-氮雜胞苷、平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)上清液誘導(dǎo)及與平滑肌細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)等方法誘導(dǎo)其向平滑肌細(xì)胞分化，通過形態(tài)學(xué)觀察及免疫組化方法比較各種誘導(dǎo)方法的誘導(dǎo)效率。 結(jié)果: 原代培養(yǎng)的兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)較為均一，呈成纖維細(xì)

2、胞樣，生長增殖迅速，傳代培養(yǎng)生長良好。培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)流式細(xì)胞儀鑒定，CD34及CD45表達很弱、而CD90強表達，證明所培養(yǎng)的細(xì)胞為較純的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。在各組誘導(dǎo)實驗中，以5-氮雜胞苷誘導(dǎo)及共培養(yǎng)誘導(dǎo)聯(lián)合處理組誘導(dǎo)組效率最高，單純共培養(yǎng)誘導(dǎo)組與5-氮雜胞苷誘導(dǎo)及上清液誘導(dǎo)聯(lián)合處理組次之，二組誘導(dǎo)率無顯著差異，單純以上清液誘導(dǎo)組效率最低。 結(jié)論: 密度梯度離心結(jié)合貼壁篩選能獲得較純的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。5-氮雜胞苷及共培養(yǎng)誘導(dǎo)聯(lián)合