腰椎軟骨終板細(xì)胞凋亡與椎間盤退變的關(guān)系研究.pdf

1、背景和目的:腰褪痛是臨床常見病之一,人群中大部分都有腰腿痛的經(jīng)歷。目前多數(shù)研究表明腰椎問盤退變(IDD)在腰腿痛中起重要作用。但導(dǎo)致腰椎間盤退變的因為,尤其是與其密切相關(guān)的椎體軟骨終板退變及細(xì)胞凋亡與其之間的關(guān)系尚未完全明了。本研究擬通過建立腰椎退變的動物模型,研究腰椎椎體軟骨終板細(xì)胞凋亡與腰椎間盤退變之間的關(guān)系,確定凋亡在其退變過程中的作用,為腰椎間盤退變性疾病的預(yù)防和治療提供新手段。
　　 方法：選取健康清潔型大白鼠24只,

2、隨機(jī)分為手術(shù)實驗組和手術(shù)對照組。手術(shù)實驗組沿L1-L6棘突做正中切口,剝離椎旁肌,切除L1-L6的棘上、棘間韌帶及兩側(cè)關(guān)節(jié)突后外1/2,誘發(fā)腰椎加速退變,手術(shù)對照組僅切開皮膚后縫合。分別于術(shù)后9周、18周、36周對兩組動物施行過度麻醉處死,完整取下包含上、下椎體的椎間盤。對腰椎標(biāo)本行矢狀位切片,分離軟骨終板和椎間盤。腰椎間盤按Thompson椎間盤退變病理分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級評定。將軟骨終板石蠟包埋切片,做HE染色和TUNNEL染色。評估軟

3、骨終板消失狀況,計數(shù)腰椎椎體軟骨終板細(xì)胞凋亡數(shù)量。
　　 結(jié)果：
　　 1.腰椎間盤退變的組織學(xué)表現(xiàn)HE染色切片,評估腰椎間盤退變程度。9周手術(shù)對照組大鼠和9周手術(shù)實驗組大鼠腰椎間盤結(jié)構(gòu)基本正常。18周手術(shù)對照組大鼠腰椎間盤出現(xiàn)輕度退變表現(xiàn),纖維環(huán)前緣軟骨組織增生,排列不規(guī)則,髓核偏向后方,髓核皺縮,纖維環(huán)出現(xiàn)裂隙。椎體邊緣光滑。18周手術(shù)實驗組大鼠腰椎問盤明顯退變,纖維環(huán)部分纖維化,纖維環(huán)和髓核分界不明顯,椎體前后緣有

4、骨贅形成。36周手術(shù)對照組大鼠腰椎間盤與18周相比退變明顯,36周手術(shù)實驗組大鼠腰椎間盤嚴(yán)重退變,纖維環(huán)完全纖維化,髓核消失,椎體前后緣骨贅。
　　 2.HE染色觀察腰椎軟骨終板細(xì)胞凋亡狀況軟骨終板的結(jié)構(gòu)隨年齡增長逐漸退變。軟骨終板形態(tài)變化明顯,退變隨時間加速。術(shù)后9周,手術(shù)對照組和手術(shù)實驗組腰椎軟骨終板較厚,可見少量散在分布的軟骨陷窩。術(shù)后18周,終板結(jié)構(gòu)出現(xiàn)局部消失,可見散在分布的軟骨陷窩、凋亡軟骨細(xì)胞和凋亡小體。術(shù)后36周

5、,退變顯著,終板消失顯著。
　　 3.Tunel染色比較手術(shù)對照組和手術(shù)實驗組軟骨終板內(nèi)細(xì)胞凋亡率9周實驗組和對照組軟骨終板內(nèi)均可見散在凋亡細(xì)胞,未見差別。18周實驗組和對照組均可見凋亡細(xì)胞較9周增多,以實驗組增多明顯,兩者出現(xiàn)差別。36周實驗組比對照組凋亡細(xì)胞數(shù)量顯著增多,兩者出現(xiàn)明顯差別。
　　 結(jié)論：
　　 1.腰椎退變實驗?zāi)Ｐ图铀倭搜甸g盤退變和終板細(xì)胞凋亡數(shù)量。
　　 2.腰椎軟骨終板細(xì)胞凋亡是