DNA甲基化酶蛋白在人胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的：消化道腫瘤發(fā)病率高，危害性大。大量研究業(yè)已證明包括胃癌在內(nèi)的惡性消化道腫瘤，其發(fā)生發(fā)展是多因素、多步驟的過程，其中DNA甲基化在基因表達(dá)調(diào)控中具有重要的作用。DNA甲基化是一個(gè)可逆性過程：一方面DNA甲基化酶(DNA methyltranferase,Dnmt)催化甲基基團(tuán)轉(zhuǎn)移至胞嘧啶參與甲基化的形成(主要是Dnmt3a和Dnmt3b)和維持（主要是Dnmt1）；另一方面去甲基化酶又起著與Dnmt相反的作用。我們擬使用免疫組化方法

2、分析胃癌組織標(biāo)本中Dnmts的表達(dá)情況，并探討其與患者臨床情況的關(guān)系。明確1）胃癌、癌旁及其正常組織中的DNA甲基化酶（Dnmt1、Dnmt3a和Dnmt3b）表達(dá)有何差異。2)胃癌組織中Dnmt蛋白表達(dá)差異是否與其生物學(xué)行為有關(guān)及其臨床意義。 方法：收集我院外科手術(shù)并經(jīng)病理證實(shí)為胃癌的患者38例，每例標(biāo)本分別取癌、癌旁和外周正常黏膜組織。所有標(biāo)本經(jīng)福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)切片4張。其中1張切片用于HE染色，由病理醫(yī)師進(jìn)行胃

3、癌組織學(xué)分類。其余3張通過鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶試劑盒(SP法)檢測(cè)組織中Dnmt1，Dnmt3a和Dnmt3b蛋白表達(dá)。觀察該三種抗體在胃黏膜組織中的表達(dá)情況，及不同類型的胃癌組織中表達(dá)量的差異。最后通過SPSS分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，并分析以上免疫組化結(jié)果與胃癌患者一般資料、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。該課題的設(shè)計(jì)和實(shí)施得到了上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。 結(jié)果：我們的研究表明：1）胃癌組織中Dnmt1、Dn

4、mt3a、Dnmt3b蛋白表達(dá)的陽(yáng)性率分別為81.6％、81.6％和68.4％，顯著高于相應(yīng)的癌旁組織（39.5％、50％和44.7％）與正常組織（10.5％、10.5％和7.9％），P<0.05。2）陽(yáng)性切片可見Dnmt1彌散分布于腫瘤或腺體細(xì)胞漿與胞核，染色較均勻。而Dnmt3a、Dnmt3b主要分布于腫瘤或腺體細(xì)胞漿，色棕黃，染色均勻。3）Dnmt1與Dnmt3a蛋白表達(dá)顯著相關(guān)(P<0.01)；未發(fā)現(xiàn)Dnmt1與Dnmt3b之間

5、存在相關(guān)性(P>0.05)；Dnmt3a與Dnmt3b間有一定相關(guān)性呈低度相關(guān)(P<0.05)。4）Dnmt1蛋白陽(yáng)性程度與年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移不相關(guān)，Dnmt3家族與患者年齡、性別、腫瘤分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無(wú)明顯相關(guān)。Dnmt1與性別、組織生物學(xué)行為可能存在關(guān)聯(lián)。 結(jié)論：我們的研究結(jié)果表明：1）胃癌存在Dnmts過表達(dá)，提示其在胃癌的發(fā)生和發(fā)展中起有重要作用。Dnmt1蛋白主要存在于胞漿和胞核，Dnmt3家族存在于胞漿。Dnmt