肝細胞生長因子(HGF)在IgA腎病中的表達和作用.pdf

1、背景：IgA腎病是世界上最常見的原發(fā)性腎小球腎炎，約20％—40％患者可逐漸發(fā)展為終末期腎疾病。IgA腎病發(fā)展到終末期腎疾病，其主要形態(tài)學(xué)特征為廣泛的腎小球硬化和腎間質(zhì)纖維化。目前研究發(fā)現(xiàn)腎組織中有多種細胞因子與IgA腎病的進展有關(guān)。肝細胞生長因子(HGF)具有多種生物學(xué)功能，通過拮抗一種強效致纖維化因子轉(zhuǎn)化生長因子(TGFβ1)，對器官的纖維化具有負性調(diào)節(jié)作用，是目前已知的少數(shù)具有腎臟保護作用的抗腎小球硬化和間質(zhì)纖維化的細胞因子之一，

2、HGF在IgA腎病中的表達及作用少有報道。 目的： 1、探討IgA腎病進展過程中，HGF表達的變化及其與TGFβ1的關(guān)系，研究IgA腎病進展中HGF抗腎纖維化的機制。 2、觀察HGF裸質(zhì)粒對IgA腎病大鼠模型的治療作用，為IgA腎病尋找一種新的治療方法。 方法： 1、收集2008年1月至2008年12月病理診斷為IgA腎病病例共69例，按Hass分級法分級。收集同期腎小球輕微病變10例為對照組。用

3、免疫組化技術(shù)和圖像分析技術(shù)，檢測病例組與對照組中HGF和TGFβ1的表達。整理收集病例尿常規(guī)、24h尿蛋白定量、血清尿素氮、肌酐等臨床資料。收集2008年5月至2008年11月IgA腎病腎活檢新鮮標(biāo)本40例，利用RT—PCR技術(shù)檢測HGFmRNA的表達。 2、首次嘗試將HGF質(zhì)粒應(yīng)用于IgA腎病動物模型的治療。采用口服牛血清白蛋白(BSA)、皮下注射四氯化碳(CCl4)加用尾靜脈注射脂多糖(LSP)復(fù)合方法，復(fù)制IgA腎病大鼠模

4、型。實驗分為4組：對照組、非治療組和激素治療組和HGF治療組。對照組為正常大鼠，余三組大鼠進行造模，激素治療組加予潑尼松灌胃，HGF治療組通過腎靜脈逆行性注射給予重組人HGF裸質(zhì)粒。檢測各組大鼠的尿蛋白、血尿、血清尿素氮、血清肌酐及腎臟病理改變，采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測各組大鼠腎組織中HGF和TGFβ1細胞因子表達情況，利用RT—PCR技術(shù)檢測大鼠腎臟中人HGF mRNA的表達。 結(jié)果： 1、HGF和TGFβ1在IgA腎

5、病中的表達。 (1) IgA腎病中，HGF和TGFγ1均有表達。HGF在HassⅠ級、Ⅱ級和Ⅲ級的腎小球區(qū)表達較Ⅳ級、Ⅴ級高，有顯著差異(P<0.05)；HGF在HassⅠ級和Ⅱ級的腎小管間質(zhì)區(qū)表達較Ⅲ級、Ⅳ級和Ⅴ級高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。TGFβ1在IgA腎病腎小球區(qū)和腎小管間質(zhì)區(qū)中，Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級的表達水平逐漸升高，三組間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；在Ⅳ級和Ⅴ級的表達比Ⅲ級降低，有顯著差異(P<0.05)

6、。在IgA腎病HassⅠ級—Ⅲ級，HGF和TGFβ1呈負相關(guān)關(guān)系(r=—0.34，P=0.013)。HGF在腎小管間質(zhì)區(qū)的表達和血清肌酐呈負相關(guān)關(guān)系(r=—0.466，P=0.002)。 (2) HGF mRNA在IgA腎病初期逐漸升高，在HassⅡ級達到最高，與其他分級有顯著差異(P<0.05)，Ⅳ級Ⅴ級HGF mRNA的表達較弱，較Ⅲ級有降低的趨勢。 2、HGF在IgA腎病大鼠模型的作用。 (1)各IgA腎病

7、組大鼠均出現(xiàn)血尿和蛋白尿，血清尿素氮和肌酐升高，HGF裸質(zhì)粒治療后血尿、蛋白尿得到改善，血清肌酐降低，與非治療組有顯著差異(P<0.05)，且HGF治療組血清肌酐水平低于激素治療組(P<0.05)。 (2)非治療組大鼠腎組織病理可見腎小球體積增大，系膜區(qū)明顯增寬，系膜細胞中度增生，系膜基質(zhì)中度增生，腎間質(zhì)淋巴細胞浸潤，各治療組病理改變與非治療組相比有所減輕。 (3)三組IgA腎病大鼠HGF蛋白表達升高，HGF治療組HGF

8、蛋白表達升高明顯，在腎小球區(qū)的表達與非治療組比較有顯著差異(P<0.05)，而與激素治療組表達無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。TGFβ1在三組IgA腎病大鼠表達均升高，菲治療組TGFβ1蛋白表達明顯升高，HGF治療組、激素治療組TGFβ1表達較非治療組低，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 (4)在HGF治療組大鼠腎臟中檢測到人HGF mRNA，其余三組未檢測到其表達。 結(jié)論： IgA腎病中HGF蛋白和mRNA的