特發(fā)性矮小相關(guān)基因單核苷酸多態(tài)性的研究.pdf

1、目的： 特發(fā)性矮?。╥diopathic short stature，ISS）是一種多基因作用而導(dǎo)致的疾病。其原因尚未明確，是一個異質(zhì)性疾病，遺傳因素在其中起到主要作用。ISS主要表現(xiàn)為垂體-生長激素-胰島素樣生長因子1軸和骨骼生長板功能異常。基于以上認(rèn)識，本研究將從垂體-生長激素-胰島素樣生長因子1軸-生長板功能相關(guān)基因位點SNP的多態(tài)性對ISS進(jìn)行一個初步的探討。 方法： 1.采用氯仿苯酚抽提法對70例病例組

2、進(jìn)行DNA提取，所提DNA采用1％瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA。 2.抽取的70例病例組DNA，在Illumina Goldengate基因分析平臺上對GHR基因和IHH基因上的5個位點進(jìn)行tSNP分型，測定等位基因和基因型分布頻率。 3.對分型結(jié)果結(jié)果進(jìn)行Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗，確定各基因型頻率是否達(dá)到遺傳平衡，具有群體代表性。 4.分型結(jié)果再與378例正常人群對照進(jìn)行等位基因、基因型以及顯性

3、模式和隱性模式下的基因型分布頻率的x2檢驗，其基因型及等位基因的相對危險度以優(yōu)勢比（Odds ratio，OR）及95％可信（CI）表示。 5.70例病例組測定其身高、坐高、指距、體重等指標(biāo)，采用葉氏骨齡評分系統(tǒng)計算其骨齡（bone age，BA），并在各項臨床指標(biāo)間進(jìn)行Pearson相關(guān)分析。 6.在70例病例組內(nèi)各基因型間分析其各項臨床指標(biāo)，兩組間采用t檢驗，三組間采用單因素方差分析。 7.70例病例組和另外

4、納入的性別、年齡與之匹配40例正常兒童對照組一同，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）測定血清IGF-1、IGFBP3水平，并進(jìn)行兩組間的比較，分析其診斷ISS的價值。 結(jié)果： 1、IHH基因的rs3099位點基因型以及等位基因頻率分布的改變與ISS相關(guān)，GG基因型及G等位基因是ISS的易感性類型 2、GHR基因的rs12515480位點基因型以

5、及等位基因頻率分布的改變與ISS相關(guān)，TT基因型及T等位基因是ISS的易感性類型 3、ISS患兒IGF-1水平低于正常兒童對照組、IGFBP3高于正常兒童對照組，rs12515480位點各基因型之間IGF-1、IGFBP3水平無差異。 4、ISS患兒下肢長坐高比值與遺傳靶身高呈正相關(guān)，提示其下肢骨生長潛能的減低。 5、IHH基因的rs3099位點基因型以及等位基因間下肢長坐高比的比較較無統(tǒng)計學(xué)意義，提示IHH基因