羥基磷灰石納米粒子負載阿霉素體外抗肝癌研究.pdf

1、納米粒子由于其獨特的納米生物學效應已經(jīng)引起了人們極大的研究興趣。納米技術(shù)是推動當今醫(yī)學發(fā)展的主要動力之一，納米粒子作為藥物載體在抗腫瘤研究方面已經(jīng)成為目前醫(yī)學研究的熱點。 羥基磷灰石(Hydroxyapatite，HAP)納米粒子不僅具有優(yōu)良的生物相容性和抑癌活性，同時也是理想的基因和藥物載體。然而，其在抗腫瘤藥物的攜帶和治療癌癥的研究還不多見。本課題選用均相沉淀法制備的1.4 mg/mLHAP納米粒子，采用振蕩培養(yǎng)使HAP納米

2、粒子吸附阿霉素(adriamycin，ADM)，使用紫外分光光度法測試并分析其吸附量，結(jié)果顯示：HAP納米粒子對5μg/mL濃度的阿霉素吸附量最大，每克羥基磷灰石吸附阿霉素的質(zhì)量為284.2679mg。采用原子力顯微鏡觀察其形貌及吸附程度，結(jié)果顯示：HAP納米粒子吸附1～5μg/mL阿霉素的效果比較好。 將HAP納米粒子負載阿霉素(5μg/mL)與Bel-7402肝癌細胞、L-02肝細胞作用，采用光學顯微鏡觀察各組細胞的形態(tài)、數(shù)

3、目和貼壁情況，結(jié)果表明HAP納米粒子負載阿霉素后與對照組(5μg/mL阿霉素)相比，Bel-7402肝癌細胞形態(tài)發(fā)生變化要小，且對正常L-02肝細胞的毒性要低。采用MTT法檢測HAP納米粒子負載阿霉素對Bel-7402肝癌細胞的生長抑制率情況和對正常L-02肝細胞的毒性影響，結(jié)果顯示：1.4mg/mL HAP納米粒子負載5μg/mL阿霉素與Bel-7402肝癌細胞作用第5天其生長抑制率高達92.90±1.25％，而單獨應用1.4mg/m

4、L，HAP納米粒子對：Bel-7402肝癌細胞生長抑制率為15.86±4.52％，5μg/mL阿霉素對Bel-7402肝癌細胞生長抑制率為81.33±1.74％，與兩藥單用相比HAP納米粒子負載5μg/mL的阿霉素的生長抑制率明顯增強。HAP納米粒子負載5μg/mL的阿霉素與L-02肝細胞作用第3天開始，其細胞毒性明顯比單用5μg/mL阿霉素的毒性降低，細胞毒性級別由3級降到2級；作用5d細胞毒性級別由4級降到2級。 采用四環(huán)素

5、和Eu摻雜分別標記HAP納米粒子與Bel-7402肝癌細胞作用，使用熒光顯微鏡觀察，結(jié)果表明2％Eu摻雜HAP納米粒子的熒光強度效果較佳。采用共聚焦激光顯微鏡動態(tài)觀察HAP納米粒子負載阿霉素與Bel-7402肝癌細胞作用的過程及分布狀況。分析表明2％Eu標記的HAP納米粒子主要進入細胞質(zhì)，HAP納米粒子負載阿霉素主要進入細胞核及細胞膜周圍，確定HAP納米粒子負載阿霉素使用熒光材料Eu摻雜標記的最佳濃度為2％(g/mL)及與細胞結(jié)合的時間