缺血預(yù)處理對膽管缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的：觀察缺血預(yù)處理對膽管缺血再灌注損傷的保護作用。 方法：Sprague-Dawley(SD)大鼠共24只，分為3個組，假手術(shù)組(shamoperation group，SO)、缺血再灌注組(ischemic-reperfusion group，IR)、缺血預(yù)處理組(ischemic-preconditioning group，IP)，每組8只。IR大鼠的處理：腹腔麻醉，無菌條件下取正中切口剖腹，游離肝周韌帶，切斷肝周韌帶內(nèi)的

2、肝臟側(cè)支血管，無損傷血管夾阻斷第一肝門20分鐘，復(fù)流1小時。IP大鼠在IR大鼠處理的基礎(chǔ)上，在正式阻斷第一肝門前，預(yù)先阻斷第一肝門5分鐘，復(fù)流5分鐘，其余同IR組。SO大鼠：腹腔麻醉，無菌條件下取正中切口剖腹，不游離肝周韌帶，不阻斷第一肝門，實驗時間同IP組。實驗結(jié)束后分別收集膽管中的膽汁、下腔靜脈血及肝外膽管標(biāo)本，處死動物。分別在電鏡下對膽管組織細胞和線粒體進行病理組織學(xué)觀察，在室溫下以黃嘌呤氧化酶法測定膽管組織中超氧化物歧化酶(su

3、peroxide dismutase，SOD)活性水平，用Olympus Au2700全自動生化儀檢測膽汁中r-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(glutamyltranspeptidase，r-GT)含量，血中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alaninetransaminase，ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase，AST)水平。 結(jié)果：電鏡下SO組膽管上皮細胞表面絨毛豐富，排列整齊，細胞核大小正常，胞質(zhì)內(nèi)線粒體豐富，分布較均勻

4、，大小正常，基質(zhì)均勻，雙層膜結(jié)構(gòu)清晰，嵴清晰可見，IR組膽道上皮細胞水腫明顯，表面微絨毛較稀疏，線粒體明顯腫脹，嵴斷裂、消失，基質(zhì)呈高度毛玻璃狀。與IR組比較，IP組膽管上皮細胞腫脹較輕，表面絨毛減少，胞質(zhì)較疏松，線粒體輕度腫脹，線粒體部分基質(zhì)脫失，有的嵴較模糊。組織病理形態(tài)學(xué)觀察表明，與SO組比較，IP組和IR組的膽管組織均出現(xiàn)損傷，IP組的損傷明顯較IR組輕。膽管組織中SOD(u/mgprot)水平，SO組為181.19±11.73

5、，IR組為161.71±10.34，IP組為175.23±6.48。統(tǒng)計學(xué)處理，IR組與S0組、IP組均數(shù)差異有顯著性意義(P<0.05)，IP組與SO組比較，均數(shù)差異無顯著性意義(P>0.05)。膽汁中r-GT濃度(Iu/L)水平，SO組為11.32±7.25，IR組為32.05±14.96，IP組為17.63±7.26，IR組與S0組、IP組均數(shù)差異有顯著性意義(P<0.05)，IP組與SO組比較，均數(shù)差異無顯著性意義(P>0.05

6、)。血中ALT(u/L)和AST(u/L)水平，SO組ALT97.50±47.02、ASI 239.65±91.72，IR組ALT 240.00±102.95、AST 558.31±236.01；IP組為145.38±65.32、372.70±152.59。IR組與SO組、IP組比較，ALT均數(shù)差異有顯著性意義(P＜0.05)，IP組與S0組比較，ALT均數(shù)差異無顯著性意義(P＞0.05)；IR組與SO組比較，AST均數(shù)差異有顯著性意義