鐵剝奪對k562細(xì)胞NF-κB p65及IκB-a表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：探討鐵剝奪劑去鐵胺對K562細(xì)胞存活和牛長的影響以及對NF-κBp65和I κ B-a表達(dá)的影響。為白血病藥物治療探索新的有效方法。 方法：(1)用臺盼藍(lán)拒染法測定K562細(xì)胞在1～7d的生長情況，繪制細(xì)胞牛長曲線。(2)實(shí)驗(yàn)分組：對照組(加入牛理鹽水)，低濃度去鐵胺組(12.5μmol)，中濃度去鐵胺組(25.0Pmol)和高濃度去鐵胺組(50.0μmol)。(3)上述各組分別與K562細(xì)胞共同培養(yǎng)。取Oh，12h，24

2、h，36h各組細(xì)胞用免疫細(xì)胞化學(xué)法測定NF—κ Bp65和I κ B-a表達(dá)。(4)用臺盼藍(lán)拒染法通過測定K562細(xì)胞存活率計(jì)算其細(xì)胞死亡率。 結(jié)果：(1)第1～3天細(xì)胞生長較為緩慢，第3～5天細(xì)胞增殖劇烈進(jìn)入對數(shù)增長期，第5～7天細(xì)胞增殖進(jìn)入平臺期。(2)NF-κ Bp65和I κ B-a陽性區(qū)平均光密度。①不同濃度DFO作用后NF-κ Bp65在12h/12.5μmol/L組與對照組無差異外(P>0.05)其它各組均與對照

3、組有差異(P<0.05)；在相同時(shí)間點(diǎn)12.5μmol/L/12h組平均光密度值為180.96±4.88與對照組間無差異，25.0μmol/L/12h組與50.0μmol/L/12h組平均光密度值分別為154.78±8.18和149.40±5.10無差異，但與12.5μmol/L/12h組比較NF-κBp65表達(dá)均有明顯降低；25.0μmol/L/24h組與50.0μmol/L/24h組平均光密度值分別為138.35±2.13和136.

4、64±1.22無差異但與本組低濃度組比較均有NF-κBp65表達(dá)明顯降低；作用36h后高濃度組與低濃度組比較NF-κBp65表達(dá)均有明顯降低；在相同濃度時(shí)24h25.0μmol/L組與36h/25.0μmol/L間平均光密度值分別為138.35±2.13和136.64±1.22無差異(P>0.05)其余各作用時(shí)間長組均比作用時(shí)間短組NF-к Bp65表達(dá)均有明顯降低(P<0.05)。②在不同濃度的DFO作用不同時(shí)間后I к B-a表達(dá)在

5、各實(shí)驗(yàn)組與對照組問均有差異(P<0.05)；在相同時(shí)間點(diǎn)低濃度組與高濃度組間均有差異(P<0.05)；在相同濃度時(shí)除12h/12.51amol/L組與24h/12．51μmol/L組間平均光密度值分別為169.80±3.00和166.72±11.57無差異(P>0.05)但與36h/12.5μmol/L組比較I K B-a表達(dá)均有明顯差異(P<0.05)，其他各組間均有差異(P<0.05)。(3) 在不同濃度DFO作用后，K562細(xì)胞死

6、亡率隨培養(yǎng)時(shí)間的延長有增加的趨勢；在相同濃度點(diǎn)時(shí)，12.5Pmol時(shí)僅36h/12.5Pmol/L組與對照組比較有意義(P<0.05)；25.0μmol時(shí)24h/25.Oμmol/L和36h/25．OPmol/L與對照組比較均有意義(P<0.05)；50.0μmol時(shí)各組與對照組比較均有意義(P<0.05)。在相同時(shí)間點(diǎn)時(shí)，12h時(shí)僅50.0μmol/L/12h組與對照組比較有意義(P<0.05)；24h時(shí)25.0μmol/L/24h組