蜘蛛香環(huán)烯醚萜類有效部位分離純化及抗焦慮研究.pdf

1、目的:
　　 研究敗醬科（Valerianaceae）纈草屬（ValerianaLinn.）植物蜘蛛香（ValerianajatamansiJones）環(huán)烯醚萜類有效部位的分離純化、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及抗焦慮作用。
　　 方法:
　　 結(jié)合前期研究考察蜘蛛香環(huán)烯醚萜類有效部位的提取工藝。采用大孔樹脂進(jìn)行富集純化，以動(dòng)態(tài)吸附—解吸方法，篩選最佳大孔樹脂;并以總環(huán)烯醚萜含量為目標(biāo)，對(duì)上樣量、洗脫劑濃度、洗脫用量和洗脫流速進(jìn)行單

2、因素考察，優(yōu)選該樹脂純化工藝。工藝放大中試制備蜘蛛香環(huán)烯醚萜類有效部位，采用TLC法鑒別、UV法測(cè)總環(huán)烯醚萜含量、HPLC法測(cè)單體含量，分析蜘蛛香環(huán)烯醚萜類有效部位成分，并研究該有效部位質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　 采用大鼠和小鼠通過高架十字迷宮(EPM)、明暗箱(LDB)、Vogel飲水沖突(VDC)和敞箱飲水(OFD)這四個(gè)經(jīng)典的焦慮模型實(shí)驗(yàn)，研究蜘蛛香環(huán)烯醚萜類有效部位抗焦慮作用。并選取敞箱飲水實(shí)驗(yàn)后大鼠，測(cè)定腦GABA和5-HT含量

3、及血5-HT含量。
　　 結(jié)果:
　　 提取工藝為:蜘蛛香藥材粗粉，用70％乙醇浸提，先8倍量浸提24h，再用6倍量浸提12h，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，得醇浸膏。最佳純化樹脂為D101，其動(dòng)態(tài)吸附量為72mg/g，解析率為83.3％。純化工藝為:浸膏用水超聲分散均勻，上D101大孔樹脂柱，比吸附量72mg/g，吸附流速1BV/h，洗脫流速2BV/h，依次用6BV的水、4BV的60％乙醇和4BV的95％乙醇洗脫，收集

4、95％乙醇洗脫液，減壓濃縮成稠膏，40℃真空干燥。TLC顯示斑點(diǎn)圓整，工藝放大中試制備的該有效部位UV法測(cè)定純度為71.5％，HPLC法測(cè)定該有效部位中Chlorovaltrate和ValjatrateB平均含量分別為8.91mg/g和7.00mg/g。依照《中國(guó)藥典·一部》編寫體例，起草了該有效部位質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　 在四個(gè)焦慮模型實(shí)驗(yàn)中，模型組(溶媒0.5％CMC-Na)動(dòng)物產(chǎn)生了焦慮狀態(tài)，而陽性組（艾司唑侖1.5mg/kg）

5、和蜘蛛香環(huán)烯醚萜類有效部位低、中、高劑量組(6、9和12mg/kg)動(dòng)物的焦慮行為均有明顯改善作用（P＞0.05、P＜0.05或P＜0.01）。敞箱飲水實(shí)驗(yàn)后大鼠腦GABA、5-HT含量及血5-HT含量，與正常組(溶媒0.5％CMC-Na)相比，模型組有非常顯著地減少(P＜0.01);與模型組相比，陽性組和該有效部位低、中、高劑量組均有非常顯著地增加（皆P＜0.01）。
　　 結(jié)論:
　　 在優(yōu)選的提取—純化工藝下，蜘蛛

6、香環(huán)烯醚萜類有效部位得率以生藥計(jì)為2.1％，純度高達(dá)71.5％;該工藝可行，純化效果好，可作為蜘蛛香環(huán)烯醚萜類有效部位制備工藝。初步建立了蜘蛛香環(huán)烯醚萜類有效部位質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，其總環(huán)烯醚萜含量以Chlorovaltrate計(jì)不得低于68％，其單體含量Chlorovaltrate和ValjatrateB分別不得少于8.0mg/g和6.5mg/g;可為該有效部位開發(fā)利用提供藥學(xué)研究參考。
　　 由以上四個(gè)抗焦慮行為學(xué)實(shí)驗(yàn)互相印證了IEF