珍龍醒腦對腦缺氧及腦缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、腦血管疾病中缺血性的腦血管病對人體健康傷害較為嚴重，腦缺血一定時間恢復血液供應后，其功能不僅不能恢復，卻出現(xiàn)更加嚴重的腦機能障礙，造成腦缺血再灌注損傷(cerebralischemiareperfusioninjury，CIRI)。隨著生活水平的提高，腦缺血疾病發(fā)病率、死亡率日益提高，對人們的正常生活造成了嚴重影響。
　　 中藥素有“多靶點、多效應”的特點，傳統(tǒng)中醫(yī)藥將CIRI歸于“中風”的范疇，一直以來探討中醫(yī)藥寶庫，創(chuàng)新中醫(yī)

2、藥在缺血性腦血管病的治療理論，尋找促進有效治療缺血性腦血管病的中藥制劑。
　　 珍龍醒腦是治療腦血管疾病的經典藏藥驗方。主要由珍珠、天竺黃、西紅花、丁香、肉豆蔻、豆蔻、草果、檀香、紫檀香、沉香、訶子、毛訶子、余甘子、木香、肉桂、蓽茇、螃蟹、金礞石、香旱芹、人工牛黃、人工麝香、廣棗、烈香杜鵑、塞北紫堇、短穗兔耳草、鐵粉（炙）、冬葵果、甘草、黑種草子組成。具有開竅醒神，清熱通絡的功能。用于痰瘀阻絡所致的中風，語言蹇澀，半身不遂，口眼

3、歪斜。其臨床效果確切，但其機制研究尚未有報道。本研究通過缺氧、結扎頸總動脈、大腦中動脈阻斷等動物模型，觀察珍龍醒腦在抗腦缺氧、腦缺血再灌注后MDA、SOD、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活力，以及腦缺血再灌注后神經學評分表現(xiàn)及對腦梗死體積的影響，探討該藥抗CIRI的機制和保護作用。
　　 一珍龍醒腦對小鼠抗缺氧的影響
　　 1珍龍醒腦對小鼠常壓缺氧的影響
　　 將小鼠隨機分為空白（0.5％羧甲基纖維

4、素鈉）組、腦心通（900mg/kg）組、珍龍醒腦（100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg）組。每天給藥一次，給藥前禁食12小時不禁水，連續(xù)7天。于末次給藥2小時，將小鼠后置于含有鈉石灰的密封250ml廣口瓶中，以呼吸停止為指標，觀察記錄死亡時間。動物置密封廣口瓶中后，呼吸逐漸減弱，直至消失，動物死亡。用藥后各組與空白對照組比較，動物存活時間有所延長，其中腦心通、珍龍醒腦高劑量組對照組相比，均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05，P＜

5、0.01)，能明顯延長小鼠存活時間。說明珍龍醒腦可延長常壓缺氧下小鼠的存活時間，提示珍龍醒腦具有抗缺氧作用。
　　 2珍龍醒腦對小鼠斷頭缺血缺氧的影響
　　 將小鼠隨機分為空白（0.5％羧甲基纖維素鈉）組、腦心通（900mg/kg）組、珍龍醒腦(100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)組。每天給藥一次，給藥前禁食12小時不禁水，連續(xù)7天。于末次給藥2小時，將小鼠斷頭，以張口為指標，觀察喘息時間。結果動物被斷

6、頭后，張口呼吸仍會持續(xù)，用藥后，可以明顯延長斷頭后呼吸維持時間。珍龍醒腦高劑量和中劑量組與對照組相比，均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，能明顯延長小鼠斷頭喘息時間。說明珍龍醒腦可明顯延長小鼠斷頭喘息時間，有對抗腦缺氧的作用。
　　 二珍龍醒腦膠囊對結扎頸總動脈致小鼠腦缺血缺氧的影響
　　 將小鼠隨機分為空白（假手術組，0.5％羧甲基纖維素鈉）組、模型(0.5％羧甲基纖維素鈉)組，腦心通(900mg/kg)組、珍龍醒腦(10

7、0mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)組。每天給藥一次，給藥前禁食12小時不禁水，連續(xù)7天。末次給藥后2小時，小鼠麻醉后行雙側頸總動脈缺血再灌注手術，夾閉10min，再通10min，灌注2次。假手術組分離出頸總動脈并穿線操作后，不夾閉血管并恢復原狀。術后24h斷頭取腦，在低溫下分取左、右腦。取左腦稱重后置80℃烘烤2小時，稱干重，計算腦組織含水量。將右腦組織充分勻漿，測定SOD、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活力

8、及MDA含量。結果顯示:缺血24小時后，模型組小鼠腦含水量明顯增加，珍龍醒腦有明顯的降低腦含水量的作用。同時，模型組小鼠腦組織中MDA含量明顯升高，SOD、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活力顯著降低，珍龍醒腦可明顯降低MDA含量，并升高SOD、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase的活力。
　　 三珍龍醒腦對電刺激大鼠頸總動脈血栓形成的影響
　　 將大鼠隨機分為空白（0.5％羧甲基纖維素鈉

9、）組、腦心通（900mg/kg）組、珍龍醒腦(100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)組。每天給藥一次，給藥前禁食12小時不禁水，連續(xù)7天。末次給藥后2小時，戊巴比妥鈉麻醉，分離右側頸總動脈，置好溫敏探頭和刺激電極，1.5mA×7min，觀察血管阻塞時間。結果顯示:刺激大鼠頸總動脈，內皮損傷，致血栓形成，阻塞血管。珍龍醒腦可明顯延長血管阻塞時間。
　　 四珍龍醒腦對大鼠大腦中動脈缺血再灌注的影響
　　 將大

10、鼠隨即分為空白（0.5％羧甲基纖維素鈉）組、模型（0.5％羧甲基纖維素鈉）組、腦心通(900mg/kg)組、珍龍醒腦(100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)組。每天給藥一次，給藥前禁食12小時不禁水，連續(xù)7天。末次給藥后2小時，10％水合氯醛腹腔注射麻醉，分離頸總動脈，與頸總動脈近心段、結扎頸總動脈，頸外、頸內分叉近心端處用動脈夾夾閉，頸總動脈兩結扎處剪口，將尼龍線插入并使進入頸內動脈，松開動脈夾。線栓兩小時后，拉出尼龍

11、線，造成再灌注模型，再灌注24小時后，進行神經行為學檢查，腦指數(shù)及腦梗死體積（TTC染色）測定。結果顯示:大腦中動脈缺血再灌注模型組動物可表現(xiàn)不同程度癥狀，致神經行為評分增加，珍龍醒腦可以明顯改善動物行為，降低評分，降低腦指數(shù)和腦梗死范圍。
　　 五珍龍醒腦對大鼠大腦中動脈缺血再灌注血小板聚集的影響
　　 將大鼠隨即分為空白（0.5％羧甲基纖維素鈉）組、腦心通(900mg/kg)組、珍龍醒腦(100mg/kg、200mg