BNIP3在食管鱗癌中的表達(dá)及其甲基化調(diào)控機(jī)制.pdf

1、研究背景:
　　 食管癌是人類常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，近年來(lái)，其發(fā)病率呈逐步上升趨勢(shì)。我國(guó)是食管癌的高發(fā)區(qū)之一，發(fā)病率和死亡率均居世界之首，病理類型以食管鱗癌為主，大約占總數(shù)的90％以上。食管鱗癌的發(fā)生是多階段、多基因參與的過(guò)程，其中遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)的異常改變都起著非常重要的作用。表觀遺傳學(xué)是研究基因表達(dá)的學(xué)科，它是指基因表達(dá)的改變不依賴DNA序列的變化。幾乎所有類型的人類腫瘤中都發(fā)現(xiàn)表觀遺傳的異常改變。表觀遺傳的異常可導(dǎo)致抑癌基

2、因的表達(dá)沉默，其中DNA甲基化在人類腫瘤中是研究最多的表觀遺傳調(diào)控方式，許多信號(hào)通路中的抑癌基因在不同類型的腫瘤中都發(fā)現(xiàn)啟動(dòng)子區(qū)高甲基化。BNIP3是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的具有抑癌作用的基因，BNIP3基因在正常組織中普遍表達(dá)，而在多種腫瘤中卻表達(dá)減少或缺失。BNIP3在食管癌中的表達(dá)及基因表觀遺傳學(xué)變化情況和其對(duì)蛋白表達(dá)的調(diào)控機(jī)制尚不清楚。
　　 研究目的:
　　 1.觀察食管鱗狀細(xì)胞癌組織及正常食管黏膜組織中BNIP3和HIF

3、-1α蛋白的表達(dá)情況，分析二者與食管鱗狀細(xì)胞癌臨床病理特征之間的關(guān)系，并分析其相關(guān)性;
　　 2.檢測(cè)食管鱗狀細(xì)胞癌組織及正常食管黏膜組織BNIP3基因甲基化狀態(tài)，并檢測(cè)相應(yīng)組織的BNIP3蛋白表達(dá)情況。研究BNIP3蛋白與BNIP3基因甲基化之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，探討它們?cè)谑彻荀[狀細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展中的作用和臨床意義。
　　 資料與方法:
　　 1.收集經(jīng)手術(shù)治療的食管鱗狀細(xì)胞癌患者的癌組織標(biāo)本72例，正常食管黏膜組織

4、標(biāo)本30例。應(yīng)用組織芯片免疫組化S-P染色技術(shù)測(cè)定BNIP3蛋白及HIF-1α蛋白的表達(dá)情況，并分析其與臨床病理之間的關(guān)系;
　　 2.收集50對(duì)食管鱗癌和正常食管黏膜組織標(biāo)本，應(yīng)用甲基化特異性PCR法檢測(cè)食管鱗癌組織和正常食管黏膜組織中BNIP3基因甲基化狀態(tài)，并應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)相應(yīng)組織中BNIP3蛋白表達(dá)情況;
　　 3.應(yīng)用SPSS17.0軟件，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1

5、.食管鱗癌組織中BNIP3蛋白表達(dá)陽(yáng)性率37.5％(27/72)，明顯低于正常食管黏膜組織的60％(18/30)(P=0.037)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;HIF-1α蛋白表達(dá)陽(yáng)性率52.7％(38/72)，明顯高于正常食管黏膜組織的13.3％(4/30)(P=0.000)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　 2.BNIP3低表達(dá)與食管鱗癌的腫瘤浸潤(rùn)深度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)（分別P=0.035、P=0.048、P=0.033），差異

6、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HIF-1α高表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(分別P=0.023、P=0.004、P=0.002)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　 3.BNIP3的表達(dá)與HIF-α的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.274，P=0.020），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　 4.食管鱗癌組織中BNIP3基因甲基化率60％(30/50)，明顯高于正常食管黏膜組織的22％(11/35)(P=0.000)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;相應(yīng)組織

7、BNIP3蛋白表達(dá)陽(yáng)性率34％(17/50)，低于正常食管黏膜組織的56％(28/50)(P=0.000)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　 5.食管鱗癌組織中BNIP3基因甲基化情況與BNIP3蛋白表達(dá)都與食管鱗癌的TNM分期和有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān);
　　 6.食管鱗癌組織中BNIP3基因高甲基化與組織BNIP3蛋白低表達(dá)相關(guān)(P=0.000)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而正常食管黏膜組織中BNIP3基因的甲基化情況與BNIP3蛋白

8、表達(dá)無(wú)顯著相關(guān)性。
　　 結(jié)論:
　　 1.BNIP3在食管鱗癌中低表達(dá)，而在正常食管黏膜中呈高表達(dá)，同時(shí)食管鱗癌BNIP3基因存在高度甲基化。因此，食管鱗癌BNIP3高甲基化可能是食管鱗癌BNIP3表達(dá)缺失的主要因素，也是食管鱗癌發(fā)生的重要原因;
　　 2.BNIP3低表達(dá)與食管鱗癌的侵犯深度、分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)，因此，BNIP3在食管鱗癌的發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要作用;
　　 3.BNIP3的低