RNAi干擾CXCR4表達(dá)對NCI-H446細(xì)胞株惡性潛能影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　本研究建立了表達(dá)CXCR4短發(fā)夾RNA(shorthairpinRNA，shRNA)的表達(dá)質(zhì)粒(pshRNA-CXCR4)，并在脂質(zhì)體的介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染小細(xì)胞肺癌NCI-H446細(xì)胞株，用G418篩選CXCR4表達(dá)下調(diào)的細(xì)胞克隆。應(yīng)用MTT試驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)、趨化實(shí)驗(yàn)(Boyden小室法)、RT-PCR、Westernblot等技術(shù)，比較研究了pshRNA-CXCR4轉(zhuǎn)染前后及SDF-1作用前后細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞趨化的變化和對細(xì)胞胞漿

2、VEGF、bFGF表達(dá)的影響，以及胞漿Ca2+熒光強(qiáng)度、bcl-2、PCNA表達(dá)的變化，以探討pshRNA-CXCR4轉(zhuǎn)染抑肺癌增殖和轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。 本研究構(gòu)建在哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)CXCR4shRNA的表達(dá)質(zhì)粒.并初步探討其對小細(xì)胞肺癌NCI-H446細(xì)胞株對CXCR4mRNA及蛋白的抑制作用。探討pshRNA-CXCR4表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染對人小細(xì)胞肺癌NCI-H446細(xì)胞株增殖、趨化運(yùn)動的抑制作用。探討pshRNA-CXCR4表達(dá)