巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子對(duì)糖皮質(zhì)激素釋放及糖皮質(zhì)激素受體功能的影響.pdf

1、第一部分、巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子對(duì)正常大鼠皮質(zhì)激素釋放和糖皮質(zhì)激素受體功能的影響 目的：觀察外源性給予鼠重組巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（rMIF）對(duì)糖皮質(zhì)激素（GC）釋放和糖皮質(zhì)激素受體（GR）功能的影響。 方法：32只SD大鼠250-300g，隨機(jī)分為4組，每組8只：對(duì)照組（C組，生理鹽水1ml）；MIF低劑量組（MIF-L組，rMIF50ng）、中劑量組（MIF-M組，100ng）和高劑量組（MIF-H組，200ng）。靜脈

2、注射rMIF后持續(xù)觀察大鼠血壓和心率6h，并于注射前，注射后5min，3，6，12，24h分別取血檢測(cè)血漿皮質(zhì)酮濃度。原代培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞，給予rMIF10、20ng/ml孵育后分別測(cè)GR和HSP90蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：外源性給予rMIF后各組大鼠血壓和心率均無(wú)明顯變化，注射rMIF后三組血漿皮質(zhì)酮濃度分別升高到197％（MIF-L組），200％（MIF-M組），248％（MIF-H組），與對(duì)照組92％比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異（n

3、=8，P<0.05）。與對(duì)照組相比，分別使用10、20ng/ml rMIF孵育3h后心肌細(xì)胞GR蛋白表達(dá)沒(méi)有明顯變化，但糖皮質(zhì)激素受體附件蛋白HSP90的表達(dá)分別減少到62％（10ng／ml組）和64％（20ng/ml組）。 結(jié)論：對(duì)健康大鼠模擬注入膿毒癥血漿近似濃度的MIF對(duì)循環(huán)機(jī)能沒(méi)有明顯影響，但促進(jìn)大鼠GC釋放，提示MIF對(duì)心血管機(jī)能的增惡作用依賴于原發(fā)病理狀態(tài)。外源性投入MIF不影響心肌細(xì)胞GR蛋白表達(dá)，但減少GR附件蛋

4、白HSP90表達(dá)數(shù)量，可能是膿毒癥GR機(jī)能減低的原因之一。 第二部分、巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子對(duì)糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合活力的影響及其可能機(jī)制 目的：觀察外源性給予鼠重組巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（rMIF）對(duì)糖皮質(zhì)激素和受體結(jié)合力的影響，并探究其可能的機(jī)制。 方法：32只SD大鼠250-300g，隨機(jī)分為4組，每組8只：對(duì)照組（C組，生理鹽水1ml）；MIF低劑量組（MIF-L組，rMIF50ng）、中劑量組（MIF-M組，1

5、00ng）和高劑量組（MIF-H組，200ng）。于注射前，注射后5min，3，6，12，24h分別取血檢測(cè)血漿一氧化氮（nitric oxide，NO）含量（亞硝酸鹽NO2-和硝酸鹽NO3-總量）。原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞，分3組進(jìn)行試驗(yàn)：對(duì)照組，僅給予[3H]-地塞米松（[3H]—Dex）5-45nM；MIF組，rMIF20ng／ml孵育3h后加入[3H]—Dex5-45nM；MIF-L-NAME（NG-Nitro—L—arginine

6、Methyl Ester，NOS抑制劑）組，加[3H]-Dex前用L-NAME100μM與rMIF一起孵育3h。以上三組分別進(jìn)行放免計(jì)數(shù)檢測(cè)。 結(jié)果：注射rMIF后三組血漿24小時(shí)平均NO含量分別為給藥前的104％（MIF-L組），99％（MIF—M組），102％（MIF—H組），與對(duì)照組98％比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與對(duì)照組相比，rMIF組、rMIF與L-NAME組肝細(xì)胞GR結(jié)合[3H]-Dex活力明顯降低，激素結(jié)合位點(diǎn)分別降低了4