神經(jīng)肽Y-Y-,5-受體拮抗劑對飲食性肥胖大鼠減肥作用的研究.pdf

1、目的1.研究誘導(dǎo)飲食性肥胖后,大鼠血漿NPY、血脂、血糖水平的變化.2.研究給予NPY-Y<,5>受體拮抗劑是否可以減少飲食性肥胖大鼠的脂肪蓄積、改善肥胖相關(guān)的脂質(zhì)代謝異常、減少肥胖發(fā)癥的發(fā)生.3.探討NPY-Y<,5>受體拮抗劑是否可以作為防治肥胖的新途徑.實(shí)驗材料與方法實(shí)驗材料1.神經(jīng)肽Y(NPY)檢測試劑:NPY放射免疫分析試劑盒購于解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所.2.NPY-Y<,5>受體拮抗劑CGP71683A:購于北京舒伯偉

2、公司.3.實(shí)驗動物:雌性Wistar大鼠35只,體重170±10g購于中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗動物部.4.飼料配方：基礎(chǔ)飼料配方(100g):豆柏25g、黃豆5g、玉米30g、酵母2.5g、麩子10g、魚粉10g、骨粉2.5g、高粱5g、標(biāo)準(zhǔn)粉8.5g、豆油1g、鹽0.5g.高脂飼料配方(100g):基礎(chǔ)飼料44g、雞蛋20g、奶粉15g、豬油15g、鮮黃豆芽5g、魚肝油1g.實(shí)驗方法1.動物的分組與飼養(yǎng)動物適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,隨機(jī)抽取7只作為對

3、照組,其余28只作為高脂飲食組.球后靜脈叢采血后,對照組飼以基礎(chǔ)飼料,高脂飲食組飼以高脂飼料誘導(dǎo)飲食性肥胖.每周記錄一次體重.誘導(dǎo)肥胖10周后,采血.恢復(fù)6日后,將肥胖大鼠按體重增長量用隨機(jī)區(qū)組法分成三組,每組9只:一組為對照組,給10﹪二甲基亞砜(DMSO),基余兩組給予NPY-Y<,5>受體拮抗劑CGP71683A(溶劑為10﹪DMSO),一組為低劑量組(5mg/ml),一組為高劑量組(10mg/ml).以上均為腹腔注射給藥,共給藥

4、28天,每天記錄攝食量,3天記錄一次體重.實(shí)驗結(jié)束后采血并采集脂肪墊.2.標(biāo)本的采集與處理2.1血清采集:實(shí)驗開始前、誘導(dǎo)肥胖后和實(shí)驗結(jié)束時,所有大鼠禁食24小時,于球后靜脈叢采血1.5ml,離心分離血清,密封待測.2.2脂肪墊采集:實(shí)驗結(jié)束后,采集大鼠腎周和腸系膜脂肪墊,稱重并冷凍.3.指標(biāo)測定3.1NPY測定:按NPY放免試劑盒中的使用說明進(jìn)行.3.2血脂測定:血清總膽固醇水平用異丙醇提取高鐵冰醋酸-硫酸顯色法;血清甘油三酯水平用異