抗阿維菌素單克隆抗體的制備與鑒定.pdf

1、試驗采用雜交瘤技術(shù)制備了兩株抗阿維菌素(AVM)的單克隆抗體的的雜交瘤細(xì)胞株2F2、2H10，對獲得的單抗進(jìn)行了初步的純化和鑒定，并建立了檢測AVM的間接競爭ELISA　　(Ci-ELISA)方法。研究結(jié)果如下：　　用合成抗原AVM-BSA免疫BALB/c小鼠，四次免疫后，采集血清，建立間接非競爭ELISA方法，并測定血清效價。結(jié)果表明：包被抗原(AVM-OVA)最適濃度為6.75μg/ml，抗體最適稀釋度為1：200?！　AL

2、B/c小鼠經(jīng)AVM-BSA五次免疫后第三天，取脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，選擇PEG1450作為融合劑，兩種細(xì)胞比例為10：1，融合率88％，陽性率為3.16％。采用有限稀釋法經(jīng)過5次亞克隆，得到兩株特異性分泌抗AVM的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株，分別命名為2F2、2H10。體內(nèi)誘生腹水法制備單克隆抗體，收集腹水并進(jìn)行單克隆抗體特性的鑒定。經(jīng)抗體亞類試劑盒測定，ELISA檢測，染色體計數(shù)和SDS-PAGE電泳檢測，表明該單克