版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、我們以前的研究結(jié)果已證明,在芹菜夜蛾核型多角體病毒(Syngraphafalciferamultiplenuclearpolyhedrosisvirus,SfaMNPV)誘導(dǎo)斜紋夜蛾(SpodopteralituraCells,SL-1)細(xì)胞凋亡過程中,細(xì)胞色素c(Cytochromec,cytc)隨著誘導(dǎo)時(shí)間的延長(zhǎng),不斷從線粒體釋放到細(xì)胞質(zhì)中。本實(shí)驗(yàn)仍然以SfaMNPV誘導(dǎo)SL-1細(xì)胞的凋亡系統(tǒng)為研究對(duì)象,利用環(huán)孢菌素A(Cyclos
2、prinA,CSA)對(duì)線粒體膜完整性的保護(hù)作用,進(jìn)一步研究了cytc對(duì)此凋亡系統(tǒng)的影響作用。完成的工作包括以下幾個(gè)方面: (1)cytc的釋放與線粒體膜電位的關(guān)系用流式細(xì)胞儀檢測(cè)線粒體膜電位(△ψm)的變化,并用western檢測(cè)線粒體與細(xì)胞質(zhì)中cytc的變化。結(jié)果表明病毒感染4hr后即出現(xiàn)膜電位的下降,且下降趨勢(shì)呈時(shí)間依賴性;而病毒加CSA處理后的細(xì)胞其線粒體膜電位下降趨勢(shì)并不明顯。Western檢測(cè)到病毒感染實(shí)驗(yàn)組,隨感染時(shí)
3、間的延長(zhǎng),線粒體中cytc的量逐漸降低,細(xì)胞質(zhì)中cytc的量逐漸升高;而病毒加CSA處理組,線粒體中cytc的量并沒有隨著感染時(shí)間的延長(zhǎng)而明顯降低,即CSA抑制了線粒體膜電位的降低和cytc從線粒體到細(xì)胞質(zhì)的轉(zhuǎn)位。這表明在SfaMNPV這種凋亡誘導(dǎo)因子的作用下,cytc從線粒體到細(xì)胞質(zhì)的轉(zhuǎn)位可能依賴于線粒體膜的通透性。 (2)cytc對(duì)caspase-3的活性及凋亡形態(tài)的影響對(duì)caspase-3的活性檢測(cè),首先用caspase-
4、3特異性序列人工合成熒光底物AC-DEVD-AFC與所提取的細(xì)胞裂解液成份反應(yīng),置熒光分光光度計(jì)上檢測(cè),結(jié)果顯示SfaMNPV感染4小時(shí)后即檢測(cè)到caspase-3的活性,且其活性呈時(shí)間依賴性增強(qiáng)。用caspase-3兔抗多克隆抗體進(jìn)行western檢測(cè),procaspase-3的表達(dá)量逐漸減少,即caspase-3活性逐漸增加。而病毒加CSA處理組的熒光強(qiáng)度值與procaspase-3的表達(dá)量都沒有明顯的變化。表明CSA抑制了casp
5、ase-3的活性。 對(duì)細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)觀察,分別對(duì)三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞進(jìn)行DAPI染色,DNA電泳,置熒光顯微鏡下與紫外燈下觀察、拍照,其結(jié)果顯示CSA處理后的細(xì)胞經(jīng)DAPI染色未被檢測(cè)到凋亡小體,DNA電泳也未檢測(cè)到有梯形條帶。筆者的實(shí)驗(yàn)還證明了在處理時(shí)間范圍內(nèi)CSA本身對(duì)細(xì)胞并不致死,因此推測(cè)CSA保護(hù)了線粒體膜的完整性,抑制cytc從線粒體釋放到細(xì)胞質(zhì)中,從而抑制caspase-3的活化與DNA片段化的下游事件,這提示了cytc
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 桿狀病毒誘導(dǎo)的斜紋蛾細(xì)胞凋亡及其機(jī)制的初步研究.pdf
- 繭蜂-斜紋夜蛾-桿狀病毒相互關(guān)系的研究.pdf
- 斜紋夜蛾核多角體病毒誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究.pdf
- 59171.桿狀病毒誘導(dǎo)昆蟲細(xì)胞凋亡初步研究
- 斜紋夜蛾重組桿狀病毒的構(gòu)建及生物學(xué)活性測(cè)定.pdf
- 干擾Cyt-c表達(dá)對(duì)AfMNPV誘導(dǎo)斜紋夜蛾細(xì)胞凋亡的影響.pdf
- 40981.茚蟲威誘導(dǎo)斜紋夜蛾細(xì)胞凋亡的研究
- 豬瘟病毒E2基因桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體的構(gòu)建及病毒誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究.pdf
- 草魚呼腸孤病毒誘導(dǎo)FHM細(xì)胞凋亡及表達(dá)VP6蛋白重組桿狀病毒的構(gòu)建.pdf
- 細(xì)胞色素C在無(wú)細(xì)胞體系中對(duì)斜紋夜蛾細(xì)胞凋亡的影響.pdf
- 桿狀病毒誘導(dǎo)SL-1細(xì)胞凋亡過程中線粒體結(jié)構(gòu)變化和凋亡相關(guān)蛋白的定位.pdf
- 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)案例
- 49241.semnpv誘導(dǎo)斜紋夜蛾細(xì)胞凋亡及spltmnpvp49基因的研究
- 信號(hào)蛋白TOR與桿狀病毒感染和昆蟲細(xì)胞凋亡的關(guān)系.pdf
- SfaMNPV誘導(dǎo)斜紋夜蛾細(xì)胞SL-1凋亡時(shí)線粒體和鈣離子的變化.pdf
- 桿狀病毒F蛋白的研究.pdf
- 桿狀病毒chaB基因的研究.pdf
- 茉莉酸對(duì)斜紋夜蛾解毒功能的影響.pdf
- 30601.pi3kakt信號(hào)通路與桿狀病毒感染和昆蟲細(xì)胞凋亡的關(guān)系
- 昆蟲桿狀病毒AcMNPV ORF38的功能研究及特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)B淋巴細(xì)胞的重組桿狀病毒的構(gòu)建.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論