稻瘟病菌T-DNA插入突變研究.pdf

1、稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)既是經(jīng)濟重要的病原真菌,也是研究植物與微生物相互作用的重要生物,從全基因組水平分析研究該菌關(guān)鍵基因的功能,可以加速對稻瘟病菌生物學及其致病分子機制的認識,為培育持久抗病品種和制定稻瘟病菌持續(xù)管理的策略提供理論依據(jù).為此,該研究利用農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化T-DNA插入技術(shù),大規(guī)模創(chuàng)建稻瘟病菌T-DNA插入突變體,并對部分突變體進行了分析,取得了如下結(jié)果:在Mullins等建立的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化Fusari

2、um方法基礎(chǔ)上,進一步優(yōu)化了農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化稻瘟病菌獲得T-DNA插入突變的條件,包括選擇轉(zhuǎn)化子的潮霉素B用量、抑制農(nóng)桿菌的抗生素頭孢噻肟鈉和羧芐青霉素的配比、不同轉(zhuǎn)化階段培養(yǎng)基的選擇等.隨機取120個突變體進行形態(tài)發(fā)育觀察,發(fā)現(xiàn)了13個顏色突變體、5個生長速度減慢突變體、14個孢子形態(tài)和產(chǎn)孢突變體、2個孢子萌發(fā)和10個附著胞形態(tài)和形成突變體.該文利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化方法成功地將T-DNA插入稻瘟病菌基因組,獲得了一批基因被標簽的突變體,并發(fā)現(xiàn)