用Ci-ELISA檢測雞組織中恩諾沙星殘留.pdf

1、恩諾沙星(ENR)屬于氟喹諾酮類合成抗菌劑,用于治療家畜禽感染性疾病.隨著ENR的大量使用,殘留于畜禽可食組織中的ENR及其代謝產物環(huán)丙沙星(CIP)引發(fā)了嚴重公共衛(wèi)生問題.為此,歐盟規(guī)定在可食性動物組織中ENR和CIP的最高殘留限量(MRL)為30 μ g/kg.目前,已建立了包括HPLC、ELISA在內的多種方法用于檢測動物組織中的ENR殘留.HPLC存在樣品前處理嚴格,耗時,成本高等缺點;ELISA方法操作簡單,經(jīng)濟而可行.該研究

2、旨在建立一種間接競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗(Ci-ELISA)檢測雞組織中ENR殘留.通過N-羥基琥珀酰亞胺活性酯法(NHS法)將半抗原ENR分別與蛋白質載體牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶聯(lián)成為全抗原ENR-BSA和ENR-OVA.ENR-BSA作為免疫原免疫家兔制備抗血清,ENR-OVA在ELISA中作為包被原.用方陣滴定法確定包被原(ENR-OVA)、抗血清、羊抗兔IgG-HRP的最佳工作濃度及反應時間,而后在此基礎上建立C