低木質素轉基因挪威云杉的植株再生及功能基因表達的微陣列檢測.pdf

1、該項目研究的目的就是采用瑞典農(nóng)業(yè)大學構建的反義ccr基因轉導的挪威云杉細胞愈傷組織,通過誘導產(chǎn)生再生植株,并檢測證實該基因是否表達及其它相關基因的表達狀況,為培育出低木質素的轉基因挪威云杉新品種奠定物質和理論基礎.以轉基因亞系A78-3、A78-4、A78-5和未轉基因對照A95∶88∶22的細胞愈傷組織為實驗材料,以DKM和LP-M熟化培養(yǎng)基培養(yǎng)五周后,再以1/4SH萌發(fā)培養(yǎng)基培養(yǎng)四周,成功地誘導形成了胚胎,并再生成新的小植株,萌發(fā)成

2、活率達到80﹪.從繼代培養(yǎng)的愈傷組織和再生小植株中分別分離總RNA,經(jīng)RT-PCR檢測反義ccr目標基因的表達情況.結果顯示:在愈傷組織和再生小植株中,A78-3和A78-4兩個亞系都有很明顯的反義帶,但A78-5沒有出現(xiàn)反義帶,從而證實了A78-3和A78-4兩個亞系的反義ccr基因已經(jīng)在愈傷組織和再生小植株中都得到了成功的整合和表達,而A78-5則沒有表達.選擇384個與木質素生物合成及植物生理代謝和環(huán)境適應性有關的基因或cDNA片