我國花生根瘤菌的多樣性和系統(tǒng)發(fā)育研究.pdf

1、中國農(nóng)業(yè)大學博士學位論文我國花生根瘤菌的多樣性和系統(tǒng)發(fā)育研究姓名：李俊申請學位級別：博士專業(yè)：微生物學指導教師：楊蘇聲2002.5.1析。16SrDNARFLP結(jié)果表明，我國花生根瘤菌分布于8個16SrDNA遺傳圖譜類型中，有23株花生根瘤菌分屬于3個已知慢生根瘤菌模式菌株的類型中。在9種限制性內(nèi)切酶中，DdeI、RsaI、MspI和Hinfl是慢生根瘤菌16SrDNARFLP分析必須選用的酶，又以前兩種酶所反映的遺傳信息量豐富。進一步

2、的23SrDNAPCRRFLP分析可將Bjaponicum和B1iaoningense與其他實驗菌株分開，揭示出更多的遺傳圖譜類型，說明用23SrDNARFLP將是進一步揭示慢生根瘤菌系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系的更為有效的手段，并發(fā)現(xiàn)CfoI、DdeI、覷礦I、和MboI為慢生根瘤菌23SrDNARFLP分析首選的限制性內(nèi)切酶。對3株花生根瘤菌代表菌株的16SrDNA全序列進行了測定和分析，得到的序列與慢生根瘤菌Bradyrhizobiumjapon

3、icum、B1缸oningense和Byuanmingense等，以及Afip婦、Blastobacter、Nitrobacter和Rhodopseudomonas屬的參比菌株序列的相似性在97％以上，系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系密切。而與該屬的另一個種Belka一甜關(guān)系較遠。以數(shù)值分類第8亞群的中心菌株2764與該群內(nèi)株菌2642和2726，以及與慢生根瘤菌已知種的模式菌株之間進行了DNA—DNA同源性測定，結(jié)果表明，該群內(nèi)菌株間的DNADNA同源性

4、均在700％以上，達到了種內(nèi)的相關(guān)水平；而菌株2764與慢生根瘤菌各種的模式菌株間的DNADNA同源性范圍為112～403％，說明這群花生根瘤菌可被認為是不同于Bradyrhizobium屬中的已知種的一個新種。結(jié)瘤試驗研究結(jié)果表明慢生根瘤菌與豆科宿主植物間存在交叉結(jié)瘤現(xiàn)象，還發(fā)現(xiàn)有些菌株與原宿主外的豆科植物根部能形成類根瘤。通過水培和土培盆栽試驗，表明花生根瘤菌株間的共生有效性差異大，一般根瘤菌的固氮能力與宿主品種有關(guān)，但也存在固氮能