利用染色體工程培育多倍體西番蓮(Passifloraedulis)的技術(shù)研究.pdf

1、西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文利用染色體工程培育多倍體西番蓮（Passifloraedulis）的技術(shù)研究姓名：張琴申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：果樹(shù)學(xué)指導(dǎo)教師：梁國(guó)魯2001.6.1利用秋水仙素，通過(guò)各種方法誘導(dǎo)西番蓮四倍體產(chǎn)生。選擇了西番蓮萌發(fā)種子、帶綠色芽點(diǎn)的愈傷組織和不定芽作為處理材料，用浸泡、混培等方法。其中，以處理愈傷組織和不定芽的效果好，誘變頻率高，嵌合體少，獲得了純合的四倍體植株，而處理種子獲得的變異株均為嵌合體；其中以浸泡法最為直

2、接、有效，誘變頻率高，達(dá)6 3 ％：以含2 0 0 m g ／L 秋水仙素的分化培養(yǎng)基處理不定芽獲得了6 7 ％的誘變頻率。秋水仙素誘導(dǎo)產(chǎn)生的變異植株染色體數(shù)目為2 n ：3 6 ，證明是四倍體植株。本試驗(yàn)還對(duì)嵌合體進(jìn)行了分離，以獲得穩(wěn)定的四倍體植株。方法是：將秋水仙素誘導(dǎo)產(chǎn)生的嵌合體葉片和莖尖切下來(lái)，接種到培養(yǎng)基H S + B A 3 ．O m g ／L + N A A O ．2 m g ／L 上誘導(dǎo)不定芽產(chǎn)生或芽叢形成，再分離各個(gè)芽

3、培養(yǎng)成苗，這樣反復(fù)多次的進(jìn)行，最后獲得了四倍體細(xì)胞占很大比例的多倍體植株。彌補(bǔ)了秋水仙素誘導(dǎo)多倍體的不足。西番蓮四倍體的繼代培養(yǎng)與增殖：取四倍體植株的莖尖、葉片和莖段培養(yǎng)在M S + B A 3 ．O m g ／L + N A A O ．2 m g ／L 上分化不定芽或誘導(dǎo)腋芽伸長(zhǎng)，增殖效果好，分化頻率達(dá)8 2 ．5 ％，增殖系數(shù)達(dá)4 ．6 ，短期內(nèi)獲得了較大數(shù)量的四倍體植株。對(duì)西番蓮不同倍性的植株進(jìn)行了形態(tài)觀察與分析。發(fā)現(xiàn)多倍體植株葉