柿單寧含量測定及腸道菌群對其代謝的研究.pdf

1、柿單寧是提取于柿果中的一種高聚合度的多酚類化合物，其結(jié)構(gòu)相當(dāng)復(fù)雜，前期研究發(fā)現(xiàn)柿單寧具有抗氧化、抗炎、預(yù)防動脈粥樣硬化等多種生理活性。因此對于柿果及柿產(chǎn)品中單寧含量的精確測定對于評價柿單寧的健康效益及其風(fēng)險評估極其重要。鑒于采用常規(guī)的測定多酚含量的方法進(jìn)行柿單寧的定量測定時，測定值與真實值存在極大的偏差，本研究選定了采用福林酚法、香草醛硫酸法、正丁醇鹽酸法及4-二甲基氨基肉桂醛法等四種不同方法測定柿單寧含量時所需的最佳標(biāo)準(zhǔn)品。同時還比較

2、了腸道菌群對四種不同連接類型的二聚體——B型連接EC二聚體、A型連接EC二聚體、A型連接ECG二聚體及A型連接EGCG二聚體的體外代謝以及柿單寧在大鼠體內(nèi)的代謝。主要研究結(jié)果如下:
　　1.柿單寧含量測定標(biāo)準(zhǔn)品的選定
　　制備柿單寧不同級分PT20、PT40、PT60，并采用甲醛沉淀法測定其含量分別為91.40％、94.40％、92.21％。在福林酚法測定柿單寧含量時，采用PT40作為其最佳標(biāo)準(zhǔn)品;在香草醛硫酸法實驗中，推薦

3、采用A型連接ECG二聚體及EGCG二聚體作為標(biāo)準(zhǔn)品，也可選用ECG單體作為其標(biāo)準(zhǔn)品;在正丁醇鹽酸法實驗中，采用PT40作為標(biāo)準(zhǔn)品為最佳;因?qū)嶒炛懈鞣N標(biāo)準(zhǔn)品在4-二甲基氨基肉桂醛法中的顯色效果都比較差，因此該法并不適合于測定柿單寧的含量。
　　2.大鼠離體腸道菌群對四種二聚體的代謝
　　四種不同連接類型的二聚體在腸道菌群的作用下均發(fā)生了不同程度的代謝。并且呈現(xiàn)出不同的降解速率，其中A型連接EC二聚體最為穩(wěn)定，降解速率最慢，其次

4、為B型連接EC二聚體，A型連接ECG二聚體與A型連接EGCG二聚體的代謝速率相差不大，且降解最快。
　　四種不同連接類型的二聚體經(jīng)過大鼠腸道菌群的作用后所得的代謝產(chǎn)物既有相同也存在著差異。B型連接EC二聚體與A型連接EC二聚體代謝后都生成了羥苯基乙酸。A型連接EC二聚體經(jīng)過代謝轉(zhuǎn)變?yōu)锽型EC二聚體;B型EC二聚體與A型EGCG二聚體的代謝產(chǎn)物中均檢測到了其單體化合物兒茶素及EGCG。
　　采用總抗氧化能力、清除ABTS+·能

5、力、清除DPPH·能力三個體系評價腸道菌群代謝原花青素二聚體后的菌液的抗氧化能力。結(jié)果顯示，在總抗氧化能力以及清除ABTS+·能力兩個體系中，原花青素二聚體與腸菌液共同培養(yǎng)6h后，其抗氧化活性均有了不同程度的增加，繼續(xù)培養(yǎng)至12h、24h后，其抗氧化活性又明顯降低。在清除DPPH·能力實驗中，其抗氧化能力也并未降低，這均表明腸道菌群對原花青素的作用會在不同程度上提高其抗氧化能力。
　　3.柿單寧在大鼠體內(nèi)的代謝
　　大鼠空腹