大白菜—結(jié)球甘藍(lán)異附加系EST-SSRs分析及耐抽薹異附加系的DH群體創(chuàng)制.pdf

1、大白菜—結(jié)球甘藍(lán)異附加系由于結(jié)球甘藍(lán)外源染色體的添加，使得異附加系表現(xiàn)出不同于受體親本的特征特性。本研究利用來(lái)自于基因轉(zhuǎn)錄區(qū)、與功能基因緊密連鎖的EST-SSRs標(biāo)記，分析異附加系中導(dǎo)入了甘藍(lán)的哪些EST序列。此外，本研究以附加結(jié)球甘藍(lán)4號(hào)染色體的耐抽薹大白菜—結(jié)球甘藍(lán)異附加系為材料，創(chuàng)制耐抽薹大白菜—結(jié)球甘藍(lán)異附加系的DH群體。并對(duì)此后代群體進(jìn)行了田間抽薹性鑒定，初步獲得了耐抽薹材料。研究結(jié)果如下:
　　 1.以4個(gè)大白菜品種

2、、3個(gè)結(jié)球甘藍(lán)品種及大白菜—結(jié)球甘藍(lán)異附加系親本的DNA為模板，對(duì)797個(gè)EST-SSRs標(biāo)記進(jìn)行篩選。結(jié)果表明:結(jié)球甘藍(lán)與大白菜間具有多態(tài)性的標(biāo)記304個(gè)，占所篩標(biāo)記的38.14％。其中包括甘藍(lán)有擴(kuò)增產(chǎn)物而大白菜無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物的標(biāo)記26個(gè)，占所篩標(biāo)記的3.26％;大白菜、結(jié)球甘藍(lán)均有擴(kuò)增產(chǎn)物，但二者擴(kuò)增產(chǎn)物片段大小存在差異的標(biāo)記278個(gè)，占所篩標(biāo)記的34.88％。大白菜、結(jié)球甘藍(lán)擴(kuò)增產(chǎn)物相同的標(biāo)記298個(gè)，占所篩標(biāo)記的37.39％。

3、>　　 2.選取擴(kuò)增條帶清晰穩(wěn)定的176個(gè)EST-SSRs標(biāo)記進(jìn)行功能分析，使用BLAST軟件將EST序列與GO、KEGG、NR數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，獲得EST序列的注釋信息。EST序列參與的生物學(xué)過(guò)程方面的功能主要集中在細(xì)胞過(guò)程、代謝過(guò)程、生物調(diào)節(jié)和刺激應(yīng)答、系統(tǒng)形態(tài)構(gòu)成、信號(hào)傳導(dǎo)與信號(hào)傳遞系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等方面。
　　 3.利用89個(gè)具有多態(tài)性的EST-SSRs標(biāo)記分析大白菜—結(jié)球甘藍(lán)異附加系，結(jié)果表明:在附加系中擴(kuò)增出甘藍(lán)相應(yīng)產(chǎn)物的

4、標(biāo)記共計(jì)33個(gè):AC1d有3個(gè)，AC2有1個(gè)，AC3有5個(gè)，AC3d有3個(gè)，AC4有3個(gè)，AC5有2個(gè)，AC7和AC7d有3個(gè)，AC8和AC8d有6個(gè)，AC9有7個(gè)。
　　 4.輻射誘變耐抽薹大白菜—結(jié)球甘藍(lán)異附加系A(chǔ)C4開(kāi)花初期的花序并收集輻射后的新鮮花粉，授于其未經(jīng)輻射誘變的適宜花蕾，收獲種子M1。
　　 5.對(duì)輻射誘變自交種M1的1143棵單株進(jìn)行田間抽薹性調(diào)查，結(jié)果顯示:不同輻射劑量與M1群體抽薹性的分離無(wú)明顯規(guī)