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1、鋅是人體必需的微量元素之一,據(jù)報(bào)道世界上超過(guò)20億人口存在不同程度缺鋅問(wèn)題。稻米是世界上50%人群的主糧,因此,研究稻米鋅營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化對(duì)人體健康具有重要意義。目前的稻米鋅營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化的研究大多數(shù)只報(bào)道了稻米鋅含量,對(duì)于稻米鋅生物有效性的報(bào)道較少。為了全面衡量稻米的鋅營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,本研究建立了體外消化/Caco-2細(xì)胞模型應(yīng)用于稻米鋅生物有效性的評(píng)價(jià)。采用該模型評(píng)價(jià)了基因型、施肥措施(葉面噴施不同形態(tài)鋅肥、磷鋅互作、硫鋅互作)、加工工藝(發(fā)芽和鋅強(qiáng)化
2、)對(duì)稻米籽粒鋅生物有效性的影響。結(jié)果如下:
1.對(duì)本試驗(yàn)條件下建立的Caco-2模型的生長(zhǎng)狀態(tài)和模型性能進(jìn)行監(jiān)測(cè),并采用該模型研究膳食成分對(duì)鋅吸收的影響。結(jié)果表明,在本試驗(yàn)條件下Caco-2細(xì)胞跨膜電阻值穩(wěn)定在630Ωcm2;Caco-2頂膜堿性磷酸酶活性顯著高于基底側(cè),表明本實(shí)驗(yàn)室條件下構(gòu)建的Caco-2模型已形成類似小腸上皮細(xì)胞的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu),細(xì)胞已形成緊密連接并產(chǎn)生良好極性,可作為腸道營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收的體外模型。分析不同濃
3、度鋅(0-50μmol/L)在Caco-2模型中的吸收結(jié)果表明,鋅吸收量在5-50μmol/L濃度范圍隨著濃度增加直線上升。膳食成分對(duì)鋅吸收率的影響表明,隨著植酸/鋅摩爾比值的增加鋅吸收率明顯下降。當(dāng)鐵/鋅摩爾比值為為10∶1時(shí),鐵對(duì)鋅有一定的抑制效果。鈣對(duì)鋅吸收無(wú)影響。維生素C對(duì)鋅吸收無(wú)影響。半胱氨酸和蛋氨酸對(duì)鋅吸收量具有一定促進(jìn)作用。
2.對(duì)大田條件下統(tǒng)一種植收獲的15個(gè)供試水稻品種的鋅含量、營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)組分、鋅生物有效性
4、、生物可利用鋅總量進(jìn)行研究。結(jié)果表明,供試水稻品種精米鋅含量和鋅生物有效性存在顯著基因型差異。對(duì)稻米營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)組分與鋅生物有效性的相關(guān)性分析,結(jié)果表明,稻米鋅生物有效性與鋅含量呈現(xiàn)無(wú)相關(guān),與植酸呈負(fù)相關(guān),與硫含量和半胱氨酸含量成顯著正相關(guān)。稻米生物可利用鋅含量也存在顯著基因型差異。稻米生物可利用鋅含量與鋅含量呈正比,與硫含量呈正比,與半胱氨酸和蛋氨酸成正比。植酸呈弱的負(fù)相關(guān)。因此,在生產(chǎn)實(shí)踐中可以通過(guò)提高稻米鋅含量,減低稻米植酸含量,增加
5、含硫氨基酸含量來(lái)實(shí)現(xiàn)稻米生物可利用鋅總量的增加。本試驗(yàn)中,IR68144和Bing91185都表現(xiàn)較高的稻米生物可利用鋅總量,可作為今后水稻鋅營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化的研究材料。
3.研究大田條件下,葉面噴施不同形態(tài)鋅肥(氨基酸鋅肥、硫酸鋅、檸檬酸鋅、EDTA螯合鋅)對(duì)稻米鋅生物有效性的影響。結(jié)果表明,葉面噴施鋅肥對(duì)水稻產(chǎn)量無(wú)影響,但是顯著提高了三個(gè)品種的糙米和精米鋅含量。糙米和精米鋅含量存在顯著性正相關(guān),說(shuō)明葉面噴施鋅肥對(duì)精米鋅含量的提
6、高來(lái)自于糙米部分提高的鋅。四種形態(tài)鋅肥的稻米鋅富集效果分析表明,氨基酸鋅肥和硫酸鋅優(yōu)于檸檬酸鋅和EDTA螯合鋅。分析原因是可能與氨基酸鋅肥和硫酸鋅分子量小有利于葉面供應(yīng)的鋅滲透進(jìn)入水稻體內(nèi)發(fā)揮作用有關(guān)。葉面噴施鋅肥對(duì)水稻精米營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)分析表明,葉面噴施鋅肥顯著降低了水稻精米植酸含量;對(duì)精米蛋白質(zhì)含量、鈣和鐵含量無(wú)影響。精米鋅生物有效性和生物可利用鋅總量分析表明,葉面噴施鋅肥提高了精米鋅生物有效性(增幅4.8-35.3%)和生物可利用鋅總量
7、(增幅13.9-68.4%)。效果最佳的是氨基酸鋅肥和硫酸鋅。分析認(rèn)為葉面噴施鋅肥對(duì)稻米鋅含量的提高,同時(shí)降低了植酸含量是造成稻米生物可利用鋅總量提高的主要原因。
4.研究盆栽條件下,不同施磷水平、葉面噴施鋅肥對(duì)水稻籽粒鋅生物有效性的影響。結(jié)果表明,隨著土壤施磷量的增加,水稻產(chǎn)量呈現(xiàn)明顯上升趨勢(shì),鋅肥對(duì)水稻產(chǎn)量的影響較小。在0-100mg/kg土施磷量范圍內(nèi),稻米鋅含量隨著磷的增加而增加,在150-200mg/kg土施磷量
8、范圍內(nèi),稻米鋅含量隨之磷的增加而降低。磷肥施用結(jié)合鋅肥能促進(jìn)稻米鋅含量提高。磷肥施用明顯提高了植酸含量。噴鋅能降低稻米植酸含量。土壤施用磷肥和噴鋅肥對(duì)稻米鋅生物有效性影響表明,不施磷和高磷肥(磷施用量超過(guò)>150mg/kg)的鋅生物有效性與稻米可吸收鋅總量均有低于其他磷施用量(50mg/kg土、100mg/kg土),特別是在200mg/kg土施磷量時(shí)對(duì)稻米鋅生物有效性和稻米可吸收鋅總量抑制效果最明顯。而施用磷時(shí),結(jié)合葉面噴施鋅肥對(duì)精米鋅
9、生物有效性和稻米生物可利用鋅含量均具有促進(jìn)作用。以上結(jié)果說(shuō)明,合理的施用磷肥,輔以葉面鋅肥有利于稻米鋅生物有效性的提高。
5.研究盆栽條件下,不同水平硫肥和鋅肥施用對(duì)稻米鋅生物有效性的影響。結(jié)果表明,硫肥對(duì)水稻產(chǎn)量具有增加效果,鋅肥對(duì)水稻產(chǎn)量無(wú)影響。硫肥的施用提高了對(duì)水稻籽粒鋅含量,且輔以鋅肥后,水稻籽粒鋅含量隨著硫肥施用量的增加而增加。對(duì)稻米營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)分析表明,施硫肥對(duì)水稻精米植酸含量無(wú)影響,對(duì)水稻硫含量有顯著提高,對(duì)半胱
10、氨酸有顯著提高。鋅肥降低了植酸含量,對(duì)蛋白質(zhì)含量、硫含量、半胱氨酸含量無(wú)顯著影響。精米鋅生物有效性和生物可利用鋅總量分析表明,單獨(dú)施硫肥和鋅肥對(duì)鋅生物有效性和生物可利用鋅總量影響較小。但硫肥和鋅肥配合施用后,精米鋅生物有效性和生物可利用鋅總量獲得明顯提高,30mg/kg土硫肥和5mg/kg土鋅肥組合時(shí)效果最佳。本研究表明,硫肥和鋅肥配合施用降低了稻米植酸含量,增加了含硫氨基酸含量,來(lái)提高稻米鋅生物有效性,同時(shí)也增加了稻米鋅含量,從而促進(jìn)
11、了稻米生物可利用鋅總量的積累。
6.研究發(fā)芽和硫酸鋅強(qiáng)化對(duì)三個(gè)供試品種(兩優(yōu)培九、Bing91185、秀水110)糙米鋅生物有效性的影響,試驗(yàn)結(jié)果表明,發(fā)芽糙米鋅含量隨著鋅強(qiáng)化濃度(25-250mg/L)增加而增加,在<150mg/L硫酸鋅強(qiáng)化濃度處理對(duì)糙米的發(fā)芽率無(wú)顯著影響,發(fā)芽和鋅發(fā)芽過(guò)程對(duì)植酸含量影響分析表明,發(fā)芽和鋅強(qiáng)化處理都能顯著降低了糙米植酸含量,但兩者之間無(wú)顯著性差異。但是鋅發(fā)芽糙米鋅強(qiáng)化的植酸/鋅摩爾比值顯
12、著低于發(fā)芽糙米。糙米鋅生物有效性和生物可利用鋅總量的影響分析表明,發(fā)芽處理對(duì)糙米鋅生物有效性和生物可利用鋅總量無(wú)影響,而鋅強(qiáng)化處理提高了糙米糙米鋅生物有效性和生物可利用鋅總量。本研究表明,發(fā)芽雖然一定程度降低了植酸含量,但是殘留的植酸仍能干擾鋅在腸道的吸收。而鋅強(qiáng)化過(guò)程,降低了植酸含量,使植酸/鋅摩爾比值大幅度下降,通過(guò)提高了鋅含量,提高了稻米生物可利用鋅總量。因此,僅僅靠發(fā)芽加工工藝對(duì)糙米鋅生物有效性無(wú)影響,需要結(jié)合鋅強(qiáng)化過(guò)程能明顯提
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