多年繼代保存蘋果組培苗繁殖特性及遺傳穩(wěn)定性研究.pdf

1、繼代保存多年后蘋果組培苗的生長繁殖特性和遺傳穩(wěn)定性的研究對蘋果種質(zhì)離體保存適宜年限的確定具有重要意義。本試驗(yàn)對不同年限接種的‘金冠’、‘喬納金’、‘嘎啦’、‘富士’莖尖組培苗分別進(jìn)行了繼代增殖、不定根誘導(dǎo)和離體葉片不定芽再生能力研究和內(nèi)源激素的分析,并從形態(tài)特征、核DNA含量、細(xì)胞學(xué)特性及分子標(biāo)記AFLP分析等方面評價了其遺傳穩(wěn)定性。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.外植體接種初期3～4年以內(nèi),即繼代次數(shù)為24或40代時,‘富士’、

2、‘金冠’、‘喬納金’的新梢增殖能力較低,‘嘎啦’生根率較低,‘金冠’、‘富士’、‘嘎啦’離體葉片再生率較低,隨著培養(yǎng)時間延長,繼代次數(shù)增加,以上品種的繼代增殖效率、生根能力及離體葉片再生能力均穩(wěn)定在較高水平。長期繼代保存的蘋果品種莖尖組培苗(‘富士’已保存25年,‘金冠’、‘喬納金’19年,‘嘎啦’10年)仍保持其器官再生能力。
　　 2.隨繼代次數(shù)的增加,試管苗中ABA和ZR含量呈下降趨勢,反映了試管苗芽分化和不定根生長。繼代

3、初期,GA含量較高。隨保存時間的延長,IAA／ZR比值穩(wěn)定在較高水平,使蘋果組培苗保持穩(wěn)定的增值和生根能力。
　　 3.‘喬納金’、‘金冠’、‘嘎啦’不同繼代次數(shù)組培苗移栽,移栽成活率均較高；移栽初期,株高和葉面積均無顯著差異,葉片數(shù)有差異,代數(shù)少的組培苗葉片數(shù)少。移栽后期,株高、葉面積、葉片數(shù)均無差異。說明3個品種組培苗遺傳穩(wěn)定性未發(fā)生變化。
　　 4.不同繼代次數(shù)組培苗在細(xì)胞核DNA含量或細(xì)胞倍性上均沒有差別,遺傳性

4、保持穩(wěn)定。利用流式細(xì)胞儀測定了‘喬納金’、‘嘎啦’、‘富士’蘋果組培苗細(xì)胞核DNA含量,不同倍性品種間細(xì)胞核DNA含量差異顯著?！吕病ⅰ皇俊扼w細(xì)胞核DNA含量平均為2.27 pg,‘喬納金’三倍體細(xì)胞核DNA含量平均為3.13pg。
　　 5.對‘金冠’、‘喬納金’‘嘎啦’、‘富士’4個蘋果品種組培苗進(jìn)行根尖染色體制片,均未觀察到染色體數(shù)目、形態(tài)等變異。
　　 6.用10對引物對,對‘喬納金’、‘金冠’、‘富士