殺線蟲真菌的篩選及菌株DF09002的鑒定、發(fā)酵優(yōu)化與產(chǎn)酶特性研究.pdf

1、從海南五指山、阿里山、定安雷鳴等地采集到29份土壤樣品,采用平板稀釋法分離獲得312株真菌。對分離的真菌進行殺線蟲活性篩選,并對殺線蟲活性最強的菌株DF09002進行了研究。主要研究內(nèi)容如下:
　　 以南方根結(jié)線蟲二齡幼蟲為靶標線蟲,首先對312株真菌進行活性篩選,結(jié)果發(fā)現(xiàn)共有22株具有抗線蟲活性(校正死亡率在70％以上),活性菌株占總分離菌株的5.6％,其中菌株DF09002分離自定安雷鳴辣椒根際土樣,其殺蟲活性最強,校正死亡

2、率達95.3％。復篩時其發(fā)酵液對根結(jié)線蟲也具有較強的殺滅效果,24h內(nèi)能將供試線蟲全部殺死,稀釋5倍后校正擊倒率仍達68.5％。
　　 通過對菌株DF09002的形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、rDNA-ITS序列測定及其系統(tǒng)發(fā)育分析的研究,將菌株DF09002歸類為曲霉屬黑色組曲霉黑曲霉集合體(genus of Aspergillusniger aggregate)中的一種。
　　 對菌株DF09002的最佳發(fā)酵條件和培養(yǎng)基組成進

3、行研究。確定菌株DF09002最佳培養(yǎng)基組成及發(fā)酵條件為:土豆汁20％,黃豆粉1％,可溶性淀粉1.5％,葡萄糖2％,酵母膏0.75％;初始pH6.5,培養(yǎng)溫度28℃,發(fā)酵時間以6天為宜,種齡36h,接種量為6％,250mL三角瓶裝液量為75mL,搖床轉(zhuǎn)速為200 r/min。
　　 對菌株DF09002產(chǎn)酶種類及特性進行研究,測出菌株DF09002可以產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶、蛋白酶,不產(chǎn)生纖維素酶。采用福林-酚試劑法測得菌株DF09002