黃瓜再生體系的建立及耐熱材料的篩選.pdf

1、黃瓜（Cucumis sativusL.）是世界上一種重要的蔬菜。黃瓜喜溫怕熱，隨著全球變暖，溫室效應(yīng)的日益嚴(yán)重，選擇耐熱性品種成了當(dāng)務(wù)之急。黃瓜的遺傳基礎(chǔ)狹窄，使常規(guī)育種工作量大，但效率低，浪費(fèi)很多的人力和物力，而耐熱突變體的離體篩選可以在人工模擬高溫的環(huán)境中進(jìn)行定向選擇，提高育種效率。本實(shí)驗(yàn)從再生體系的建立、耐熱突變體的篩選和耐熱體細(xì)胞無(wú)性系的鑒定進(jìn)行研究，進(jìn)而獲得耐熱性的材料。主要結(jié)果如下：
　　 1再生體系的建立

2、　　 以多代自交系07X-2、07X-3（耐熱性不同）為材料，通過(guò)苗齡、子葉大小、IAA、NAA和6-BA五個(gè)方面，對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)進(jìn)行研究。結(jié)果表明：07X-2黃瓜在苗齡為6d，切去1/2子葉大小時(shí)在MS+0.1mg/LIAA+1.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA的培養(yǎng)基上出愈率最高并且質(zhì)量好；07X-3黃瓜在苗齡為7d，切去1/2子葉大小時(shí)在MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA的培養(yǎng)基上出愈率最高并且質(zhì)量好。

3、
　　 將綠色緊實(shí)的07X-2黃瓜愈傷組織接種到附加不同激素組合的MS培養(yǎng)基中，進(jìn)行芽的誘導(dǎo)。結(jié)果表明：07X-2黃瓜的愈傷組織在MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LIAA+3.0mg/LAgNO3的培養(yǎng)基上芽誘導(dǎo)率最高。
　　 選取07X-2黃瓜大小一致的誘導(dǎo)芽，每2～3個(gè)芽分成一簇，將這些芽轉(zhuǎn)接到含有不同質(zhì)量濃度6-BA或者KT的MS培養(yǎng)基中，篩選芽伸長(zhǎng)的最佳激素濃度。結(jié)果表明：在附加0.05mg/L6-BA

4、的MS培養(yǎng)基上芽生長(zhǎng)快并且質(zhì)量高。
　　 2耐熱突變體的離體篩選
　　 將07X-3黃瓜綠色緊實(shí)的愈傷組織放入38℃、42℃、45℃的脅迫溫度下進(jìn)行高溫處理，處理時(shí)間分別為8h、12h、16h、20h。結(jié)果表明：最佳脅迫處理?xiàng)l件為45℃，12h，此時(shí)愈傷的存活率達(dá)到半致死劑量以下且存活率比較高，適合進(jìn)行耐熱體細(xì)胞無(wú)性系變異的篩選。
　　 07X-2、07X-3黃瓜的愈傷組織經(jīng)過(guò)逐步高溫處理法和直接高溫處理法處理后

5、，將存活的愈傷組織再生成苗。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：兩種處理方法都能顯著降低愈傷組織的存活率，延長(zhǎng)芽誘導(dǎo)的時(shí)間。
　　 3耐熱體細(xì)胞無(wú)性系的初步鑒定
　　 在大棚中，對(duì)母株、再生植株的D1代、耐熱性再生植株進(jìn)行熱脅迫處理，室內(nèi)測(cè)其生理生化指標(biāo)。結(jié)果表明：07X-2耐熱再生植株的耐熱性都比母株強(qiáng)；07X-3耐熱再生植株的耐熱性有20％的比母株強(qiáng)。07X-2再生植株的D1代的耐熱性都比母株強(qiáng)，07X-3再生植株的D1代有40％的比母株的耐