山東省玉米紋枯菌種類鑒定及玉米材料抗性鑒定.pdf

1、隨著緊湊型玉米品種的種植和推廣、氮肥施用量的增加和種植密度的提高，近年來玉米紋枯病在山東省呈逐年加重的趨勢(shì)。國(guó)內(nèi)關(guān)于紋枯病的研究多集中在水稻和小麥，而對(duì)玉米紋枯病的研究相對(duì)滯后。本研究對(duì)山東省玉米紋枯菌融合群類型、菌絲生長(zhǎng)速率、致病性以及遺傳多樣性進(jìn)行系統(tǒng)研究，并對(duì)山東省玉米生產(chǎn)品種和部分自交系進(jìn)行抗性鑒定，篩選抗紋枯病的優(yōu)良玉米材料，為玉米抗病育種和玉米紋枯病的綜合防治提供依據(jù)。
　　 1.從山東省14個(gè)縣市采集玉米紋枯病標(biāo)本

2、，分離得到103個(gè)絲核菌菌株。Hoechst33258細(xì)胞核染色和融合群測(cè)定結(jié)果表明，這些菌株分別屬于多核絲核菌的AG-1-IA、AG-1-IB、AG-1-IC、AG-3、AG-4-HG-I、AG-5、WAG-Z融合群，雙核絲核菌的AG-Ba融合群，以及種類尚未確定的單核絲核菌JN-001。其中AG-1-IA類型菌株占總數(shù)的59.22％，為優(yōu)勢(shì)融合群。
　　 2.采用病原菌侵染的高粱粒作為接種物，對(duì)三個(gè)玉米品種（川單14、川單1

3、3、成單12）進(jìn)行苗期接種測(cè)定病原菌的致病性。利用DPS系統(tǒng)對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行UPGMA聚類分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同菌株間致病力存在顯著差異，根據(jù)平均病情指數(shù)將菌株分為致病力強(qiáng)、中、弱三類。平均病情指數(shù)在58.89～73.33的為強(qiáng)致病力的菌株，占菌株總數(shù)的12.62％;平均病情指數(shù)在17.78～54.44的為中等致病力的菌株，占菌株總數(shù)的79.61％;平均病情指數(shù)在5.56～12.22的為弱致病力的菌株，占菌株總數(shù)的7.77％。對(duì)各個(gè)融合群的致

4、病力進(jìn)行統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，以AG-4-HG-I融合群的致病力最強(qiáng)，AG-1-IC次之，單核絲核菌JN-001致病力最弱，其中優(yōu)勢(shì)融合群AG-1-IA菌株致病力分化明顯。
　　 3.對(duì)玉米紋枯菌的生長(zhǎng)速率進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，不同菌株間生長(zhǎng)速率差異較大，生長(zhǎng)速率在0.84～2.41mm/h之間，12h后進(jìn)入快速生長(zhǎng)時(shí)期。對(duì)菌株生長(zhǎng)速率和致病力相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，二者相關(guān)系數(shù)為0.5677，存在中等強(qiáng)度的正相關(guān)性，符合回歸方程X2=-7.0642

5、+26.4067X1(X1=生長(zhǎng)速率，X2=病情指數(shù))。
　　 4.利用ISSR標(biāo)記技術(shù)對(duì)山東省103個(gè)玉米紋枯菌的遺傳多樣性進(jìn)行分析。從16個(gè)常規(guī)引物中篩選出3個(gè)重復(fù)性好、特異性高的引物。ISSR-PCR結(jié)果表明103個(gè)測(cè)試菌株共產(chǎn)生45個(gè)分子標(biāo)記，其中91.1％的片段具有多態(tài)性。各地理群的平均多態(tài)位點(diǎn)百分率為51.78％，Nei's基因多樣性指數(shù)(h)平均為0.1754，Shannon信息指數(shù)(I)平均為0.2647，顯示出

6、地理群間具有較高的遺傳多樣性。利用NTSYSpc2.10e進(jìn)行UPGMA聚類分析可將103個(gè)菌株分成6個(gè)遺傳類群，研究發(fā)現(xiàn)ISSR遺傳群組劃分與菌株的地理來源和菌株所屬融合群類型存在一定的相關(guān)性。
　　 5.通過兩年對(duì)山東省72份玉米生產(chǎn)品種和30份自交系材料在田間進(jìn)行紋枯病抗性鑒定，采用被病原菌侵染的高粱粒作為接種物，在玉米拔節(jié)中后期接種，按照國(guó)家玉米區(qū)域試驗(yàn)抗性鑒定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病害分級(jí)評(píng)定和抗性評(píng)價(jià)。在102份材料中沒有發(fā)現(xiàn)免疫