辣椒疫病生物防治的研究.pdf

1、1.生防菌的分離、篩選及其生物學特性的研究本試驗從甘肅各地采集的179份土樣中分離得到481株細菌，對10種以上病原真菌有抑制作用的細菌有89株；用抑菌帶-定殖力雙重測定法，從中篩選出3株在辣椒根際定殖能力最好、抑制辣椒疫霉菌能力較強的生防菌F-152、Q-28和O-39。 生防菌生物學特性試驗結(jié)果表明，3菌株的最適培養(yǎng)時間為20～28h；最適培養(yǎng)溫度為30～37℃；最適培養(yǎng)液PH為6～8；通氣量對3菌株的生長影響不明顯。F-1

2、52生長的最適NaCL濃度為0.17％，蔗糖濃度為9％；Q-28和O-39生長的最適NaCL濃度為1.5％，蔗糖濃度為3％。 2.生防菌的鑒定經(jīng)培養(yǎng)性狀和形態(tài)學特征的觀察及生理生化特征的測定，初步鑒定F-152、Q-28和O-39菌株均為多粘類芽孢桿菌(Paenibacilluspolymyxa)，但3菌株的培養(yǎng)性狀和生理生化特征各有不同。F-152和O-39菌株的16SrDNA序列分析結(jié)果表明，它們分別與GenBank中已報道

3、的Paenibacilluspolymyxa16SrDNA序列(登錄號：AY302439和AY359622)有99％的相似性，由系統(tǒng)樹可見F-152與O-39的親緣關系較遠，證實了形態(tài)特征與生理生化鑒定結(jié)果。F-152和O-39菌株保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，保藏號分別為M206041和M206042。 3.生防菌在辣椒根部及根圍土中的定殖動態(tài)研究本試驗結(jié)果表明，生防菌高濃度接種在辣椒根部及根圍土中的定殖濃度始終

4、高于低濃度接種的定殖密度，高濃度接種F-152、Q-28和O-39的定殖消長動態(tài)都是先降后升再降并逐漸保持穩(wěn)定，到60天時，定殖密度仍可保持在3-5個數(shù)量級；接種辣椒疫霉菌對F-152的定殖影響較大，O-39次之，對Q-28的定殖影響不太明顯；先接種生防菌后接種辣椒疫霉菌對生防菌的定殖影響較小，相反則影響較大。 4.生防菌室內(nèi)抑菌控病效果研究抑菌試驗結(jié)果表明，3菌株的無菌濾液對辣椒疫霉菌的抑制率較低，但滅菌培養(yǎng)液的抑菌率有明顯提

5、高。3株生防菌浸種對辣椒種子發(fā)芽率都有明顯的提高。溫室試驗結(jié)果表明，采用培養(yǎng)液灌根接種生防菌，以先接種生防菌，5天后接種病原菌，2天后再接種生防菌，待發(fā)病后再接種生防菌的方法處理，可得到最好的防治效果，即O-39、Q-28和F-152培養(yǎng)液28天時的防治效果分別為90.63％、88.40％和67.04％。 5.F-152與B-21原生質(zhì)體融合選育多功能生防菌通過對能有效定殖于辣椒根際的多粘類芽孢桿菌F-152(Rif+、Em-)