重慶煙草赤星病菌的致病力分化及遺傳差異性研究.pdf

1、煙草赤星病是煙草生長后期重要的葉部真菌性病害。是煙草生產(chǎn)中最具威脅的惡性病害之一。本試驗在煙草成熟采摘期，從重慶武隆、巫山、奉節(jié)、彭水、黔江、石柱、酉陽等煙區(qū)隨機采集具典型赤星病癥狀的煙草病葉標本，經(jīng)分離、純化并通過常規(guī)組織分離得到赤星病菌共27株。對所得菌株初步測定其致病力，并對不同致病力菌株進行培養(yǎng)性狀的測定及對采自不同煙區(qū)不同致病力菌株進行RAPD分析。研究結(jié)果如下： 1．在煙葉成熟采摘期，選取病斑為圓形或不規(guī)則圓形，外圍

2、有淡黃色暈圈，褐色，且產(chǎn)生明顯的同心輪紋的赤星病葉標本。在實驗室經(jīng)分離純化并通過常規(guī)組織分離得到赤星病菌株共27株，其中武隆7株，彭水2株，奉節(jié)2株，秀山2株，酉陽3株，石柱3株，黔江1株，巫山7株。在馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)上培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，不同菌株在菌落性狀、菌落顏色以及氣生菌絲高度等方面均存在一定的差異。 2．試驗表明利用離體葉片懸滴接種法可較好地測定煙草赤星病菌的致病力，可將煙草赤星病菌致病力區(qū)分為強、較強、中、弱4種類型

3、。對27個菌株進行的致病力篩選試驗結(jié)果表明，不同菌株對煙草品種K326的致病力差異顯著，其中較強致病力菌株3株，中等致病力菌株20株，弱致病力菌株4株，分別占供試菌株的11.1％、74.1％、14.8％，未發(fā)現(xiàn)強致病力菌株和無致病力菌株。表明所分離得到的多數(shù)菌株致病力居中。此外，不同病原菌株對離體葉片的穿透生長能力的測定結(jié)果顯示，赤星病菌對煙草葉片的穿透生長能力與致病力呈明顯的正相關(guān)。 3．對27個菌株致病力初步篩選試驗結(jié)果表明

4、，從不同煙區(qū)分離得到的煙草赤星菌株致病力是存在差異的，其中石柱的平均致病力最高，平均病情指數(shù)為62.0，而酉陽平均致病力最低，平均病情指數(shù)為28.6。在同一煙區(qū)的不同菌株之間也存在明顯的致病力分化。 4．不同致病力菌株的培養(yǎng)性狀比較表明：在25℃下，各供試菌株在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)7d，菌落直徑均達到4cm以上，產(chǎn)孢量均達到105個/mL水平，但較強致病力菌株D7-1、J4-5-5的生長速度較慢，菌落直徑分別為4.27cm、4.6

5、5cm，產(chǎn)孢量較少，分別為4.1×105個/mL、2.2×105個/mL；中等致病力菌株A1-1、H2-2-3的菌落生長直徑分別為6.14cm、6.50cm，產(chǎn)孢量分別為5.5×105個/mL、6.0×105個/mL。在馬鈴薯葡萄糖液體(PD)培養(yǎng)基中各供試菌株菌絲增重量相差較大，致病力較強菌株D7-1、J4-5-5的菌絲增重多，菌絲干重分別為1.098g、0.886g，中等致病力菌株A1-1、H2-2-3的菌絲干重分別為0.835g、

6、0.794g。說明致病力強的菌株，在25℃下PDA培養(yǎng)基上菌落擴展速度較慢，產(chǎn)孢量少，但在馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中菌絲增重多。然而，致病力弱的菌株，在25℃下PDA培養(yǎng)基上菌落擴展速度較快，產(chǎn)孢量多，但在馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中菌絲增重較少。對不同致病力菌株毒素毒性的測定試驗結(jié)果表明，不同致病力菌株所產(chǎn)毒素對煙草幼苗和煙草葉片的作用均存在一定的差異。在相同條件下強致病力菌株的毒素能夠使煙草K326幼苗枯萎死亡，弱致病力菌株只導致部分幼苗

7、出現(xiàn)黃化、生長緩慢的現(xiàn)象。應用離體葉片針刺法的毒素測定結(jié)果表明，相同條件下致病力強的菌株的粗毒素作用煙葉3d后的病斑直徑達到約2.5cm，而致病力弱的菌株所得粗毒素只產(chǎn)生約0.5cm的病斑。因此不同致病力菌株產(chǎn)生毒素的毒性是有差異的，煙草赤星病菌致病力與其毒素毒性呈正相關(guān)趨勢。 5．對采自不同煙區(qū)不同致病力的煙草赤星病菌進行隨機多態(tài)性分析表明，不同致病力的菌株所擴增出來的條帶都是多態(tài)帶，可初步判定不同致病力菌株在遺傳上是存在差異