擬南芥LYSOPL2基因及其油菜同源基因的克隆及功能分析.pdf

1、植物油脂的儲存形式為三酰甘油(TAG)，它是一種人類生活所必需的重要營養(yǎng)物質，也是重要的工業(yè)原料和潛在的可再生生物質能源。提高油料作物油脂含量是育種工作者改良作物品質性狀的主要目標。而應用分子生物學方法分離油脂合成相關基因、研究植物油脂合成的分子機制顯然已成為分子育種的重要方向。單酰甘油?；D移酶MGAT是花生油脂合成過程中重要的調控因子，MGAT基因在酵母中的過表達可以導致甘油三酯的積累增加。在本研究中我們分別對擬南芥和油菜里MGAT

2、的同源基因LYSOPL2和BnCC5進行了克隆和功能驗證分析。本研究結果對于通過基因技術進一步提高油料作物含油量具有潛在應用價值。主要結果如下:
　　1)分別在擬南芥和油菜里克隆了MGAT的同源基因LYSOPL2和BnCC5。
　　2)構建了擬南芥LYSOPL2基因的過表達載體并轉化擬南芥，構建了油菜BnCC5基因的RNAi干涉載體、含雙35S和自身啟動子的過表達載體。
　　3)通過在擬南芥中過表達LYSOPL2基因，

3、發(fā)現(xiàn)T3、T4和T5代轉基因后代成熟種子的含油量與野生型相比較提高約2.6％，差異達到顯著水平;T3代純合的T-DNA插入突變體與野生型相比較，種子含油量降低4.51％，差異達到極顯著水平，T4、T5代純和的T-DNA插入突變體與野生型相比較，種子含油量降低0.6％，差異不顯著。
　　4)利用農桿菌介導轉化法將油菜BnCC5基因的RNAi干涉載體、含雙35S啟動子的過表達載體成功轉化到甘藍型油菜Westar和甲572，獲得了轉化株