丙酮酸、肌酸及丙酮酸肌酸對肉雞氨基酸譜的影響及相關(guān)酶活性的研究.pdf

1、丙酮酸肌酸(creatine pyruvate,CrPyr)是一種新型多功能的營養(yǎng)素,兼具丙酮酸和肌酸的雙重功能。丙酮酸肌酸的主要效應(yīng)成分--丙酮酸和肌酸均為機(jī)體內(nèi)重要的代謝中間產(chǎn)物,其對機(jī)體的能量代謝、脂肪代謝和蛋白質(zhì)代謝均可能產(chǎn)生一定的影響.業(yè)已以證實CrPyr能夠促進(jìn)能量的產(chǎn)生和耐力的維持,提高運動能力,重建能量儲備,保持健康狀態(tài),縮短疲勞后的恢復(fù)時間,幫助瘦弱機(jī)體體重恢復(fù)(增加肌肉重量).目前,對于CrPyr的研究主要集中在運動

2、生理學(xué)方面,其對家禽蛋白質(zhì)代謝影響的研究鮮有報道。本文選用雄性Arbor Acres(AA)肉雞為實驗動物,研究外源性補(bǔ)充CrPyr對肉雞組織中氨基酸譜及相關(guān)酶活性的影響,旨在為調(diào)控家禽蛋白質(zhì)的沉積提供理論依據(jù)。
　　 1氨基酸反相高效液相色譜分離檢測法的建立
　　 本研究以鄰苯二甲醛(OPA)為衍生劑,柱前衍生,Waters Spherisorb ODS柱(4.6mmx250mm,5μm)分離,梯度洗脫,熒光檢測,在3

3、5分鐘內(nèi)使15種混合氨基酸全部得到有效分離。結(jié)果顯示,在5.20-333nmol·L-1濃度范圍內(nèi),氨基酸的峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)均在0.999-1之間。不同氨基酸測定的日內(nèi)、日間精密度分別為2.32％-5.02％和4.20％-5.90％。最低檢測限為1.2nmol·L-1.研究結(jié)果說明,本方法具有操作簡單、靈敏,線性和回歸系數(shù)良好,可以作為定性或定量的依據(jù)。
　　 2丙酮酸、肌酸及丙酮酸肌酸對肉雞部分組織中氨

4、基酸譜的影響
　　 本研究以400只21日齡AA肉雞,隨機(jī)分為4組,每組4個重復(fù),每個重復(fù)25只.對照組(C組)飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗組分別在基礎(chǔ)日糧中添加2％的丙酮酸(T-Ⅰ組),3％肌酸(T-Ⅱ組),5％丙酮酸肌酸(T-Ⅲ組)。飼養(yǎng)至42日時,各組每個重復(fù)分別隨機(jī)宰殺4只,采血并分離血清,采集肝臟及腿肌組織樣品,-20℃保存。采用鄰二甲苯(OPA)柱前衍生反相高效液相色譜儀法(RP-HPLC)檢測血清、腿肌、肝臟組織氨基酸含量的

5、變化。在35分鐘內(nèi)血清、腿肌及肝臟組織中15種混合氨基酸全部得到有效分離檢測。結(jié)果顯示,丙酮酸、肌酸、丙酮酸肌酸均使肉雞血清中Thr、Trp的含量極顯著降低；丙酮酸、肌酸、丙酮酸肌酸均能夠能顯著升高腿肌中Arg和Val的含量；丙酮酸、肌酸、丙酮酸肌酸能夠顯著升高肝臟中Asn、Thr、Tyr扣Val的含量。本實驗表明,丙酮酸、肌酸以及丙酮酸肌酸可通過調(diào)節(jié)AA肉雞不同組織中氨基酸的含量,從而間接地改變營養(yǎng)物質(zhì)在體內(nèi)的代謝流向
　　

6、3丙酮酸、肌酸及丙酮酸肌酸對肉雞體內(nèi)相關(guān)酶活性的影響
　　 試驗設(shè)計及樣品采集同第四章。分別采用試劑盒檢測肝臟及血清中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(CAT)、總抗氧化(T-AOC)能力和丙二醛(MDA)含量,肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性及肌肉中肌酸激酶(CK)活性。結(jié)果顯示,丙酮酸肌酸降低肝臟中GSH-PX的活性強(qiáng)于肌酸；丙酮酸肌酸、丙酮酸、肌酸都具有一定的總抗氧化能力,但丙酮酸肌酸