黃瓜根莖鐮孢菌的分離鑒定及遺傳多樣性分析.pdf

1、黃瓜枯萎病是由半知菌亞門鐮孢菌（Fusarium spp.）侵染引起的一種土傳病害，是影響黃瓜生產(chǎn)的最主要病害之一。由于保護地的特殊環(huán)境條件和長期連作，土壤中病原菌量的積累越來越多，致使黃瓜枯萎病等土傳病害發(fā)生逐年加重。本研究通過對中國8個地區(qū)黃瓜根莖鐮孢菌進行分離、鑒定及多樣性研究，旨在明確中國8個不同省市黃瓜枯萎病的主要致病菌及其遺傳多樣性，為黃瓜枯萎病的科學(xué)診斷、生理分化及抗病育種奠定基礎(chǔ)。
　　 1.對采集自哈爾濱、長春

2、、沈陽、北京、保定、銀川、西寧及杭州8個城市的478株鐮孢菌進行形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)鑒定，確定它們屬于7種鐮孢菌，分別為尖孢鐮孢菌（Fusarium oxysporum），銳頂鐮孢菌（Fusarium acuminatum），木賊鐮孢菌（Fusarium equiseti），腐皮鐮孢菌（Fusarium solani），半裸鐮孢菌（Fusarium semitectum），輪枝鐮孢菌（Fusariumverticillioides）和層出

3、鐮孢菌（Fusarium proliferatum）。其中尖孢鐮孢菌占77.62％，銳頂鐮孢菌占0.21％，木賊鐮孢菌占3.97％，腐皮鐮孢菌占15.48％，半裸鐮孢菌占1.46％，輪枝鐮孢菌占0.84％，層出鐮孢菌占0.42％。
　　 2.對分離得到的478株鐮孢菌進行致病性測定結(jié)果表明，尖孢鐮孢菌（Fusariumoxysporum）為哈爾濱、長春、沈陽、北京、保定、銀川、西寧和杭州地區(qū)黃瓜枯萎病的主要致病菌。雖然在上述地區(qū)

4、的黃瓜枯萎病株上同時分離到腐皮、木賊、銳頂、半裸、層出和輪枝鐮孢菌，但接種后各菌株均未見侵染癥狀，屬非致病菌。
　　 3.通過對478株鐮孢菌菌株生長速率與致病力進行相關(guān)性分析得知，菌株生長速率與病情指數(shù)之間相關(guān)性顯著，這也表明菌株的生長速率快致病力相應(yīng)就高，致病力的高低與生長速率快慢有關(guān)。
　　 4.應(yīng)用AFLP分子標記檢測了中國8個城市黃瓜枯萎病菌的遺傳多樣性及不同地區(qū)菌株間的親緣關(guān)系。在130對引物組合中，篩選出1

5、6對多態(tài)性好、帶型清晰的引物組合。利用這16對引物組合對371株尖孢鐮孢菌進行了PCR擴增，共擴增出123082條帶，其中多態(tài)性標記53463條，占43.44％。利用NTSYSpc軟件中UPGMA算法構(gòu)建了黃瓜枯萎病菌的親緣關(guān)系樹狀圖，聚類分析結(jié)果表明中國黃瓜枯萎病菌的遺傳多樣性與病原菌的地理來源有一定的相關(guān)性，同時中國黃瓜枯萎病菌遺傳分化較大，不同地區(qū)群體遺傳多樣性比較豐富。
　　 5.利用篩選出的引物組合E14/M11對尖孢