降解纖維素細(xì)菌的鑒定、產(chǎn)酶條件優(yōu)化及酶學(xué)特性分析.pdf

1、纖維素是地球上分布最廣、數(shù)量最大、含量最豐富的可再生資源，其生物合成和生物降解維持生物圈的主要碳循環(huán)。近年來，由于人口數(shù)量膨脹、石化資源的短缺、生態(tài)環(huán)境的破壞以及全球氣候的惡化，使纖維素生物質(zhì)轉(zhuǎn)化及開發(fā)纖維素酶新工藝具有重大的戰(zhàn)略意義。在轉(zhuǎn)化纖維素生物質(zhì)和開發(fā)纖維素酶的過程中，細(xì)菌由于其繁殖快、產(chǎn)酶速度快、發(fā)酵周期短等優(yōu)勢，發(fā)揮著重要作用。
　　本實驗對篩選出的五株具有較高活性產(chǎn)纖維素酶的細(xì)菌進行了鑒定，這五株菌株的菌落形態(tài)、菌體

2、形態(tài)和生理生化試驗指標(biāo)與芽孢桿菌屬的基本特征一致，同時，它們16SrDNA序列及同源性都與枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）的16SrDNA序列有99.0％同源性，并且通過構(gòu)建系統(tǒng)進化樹上發(fā)現(xiàn)它們和枯草芽孢桿菌具有較近的遺傳距離。
　　對影響產(chǎn)纖維素酶活的三個因素：培養(yǎng)時間、溫度和pH進行了單因子實驗研究，得出芽孢桿菌（Bacillus sp）GDW產(chǎn)纖維素酶的最佳條件：pH4.0，溫度40℃，培養(yǎng)時間24h。

3、r>　　采用Plackett-Burman法對產(chǎn)纖維素酶芽孢桿菌（Bacillus sp）GDW產(chǎn)纖維素酶的液態(tài)培養(yǎng)基組分進行了顯著性分析，發(fā)現(xiàn)羧甲基纖維素鈉、硫酸銨和硫酸鎂為顯著因素（P<0.05）。采用Box-Wilson中心組合設(shè)計對影響 CMCase酶活的三個因素，CMCase酶活為響應(yīng)值進行響應(yīng)面優(yōu)化，優(yōu)化后發(fā)酵培養(yǎng)基組成（g/L）為：羧甲基纖維素鈉21.33g，硫酸銨10.865g，硫酸鎂1.113g，磷酸二氫鉀2.0g，氯