黑曲霉利用五倍子固體發(fā)酵產(chǎn)單寧酶的條件研究

1、黑曲霉B0201利用五倍子固體發(fā)酵產(chǎn)單寧酶的條件研究摘要:通過比較常規(guī)滅菌發(fā)酵和生料發(fā)酵研究黑曲霉B0201利用五倍子固體發(fā)酵產(chǎn)單寧酶的條件。結(jié)果表明在生料發(fā)酵過程中采用20%五倍子并且以(NH4)2SO4為氮源制備單寧酶的最佳條件為:液固比=1.6:1、溫度30C、初始pH6.0。在該條件下通過96h的培養(yǎng)單寧酶的活力可達51.2Ugds是常規(guī)滅菌發(fā)酵的3.6倍。以上結(jié)果顯示生料發(fā)酵生產(chǎn)單寧酶是一種高效可行的方法。關鍵詞:黑曲霉單寧酶

2、生料發(fā)酵五倍子固體發(fā)酵ResearchonConditionsofTannaseProductionfromAspergillusNigerB0201UnderSolidstateFermentationUsingGallnutLIYangZhen12QIUShuYi12BAOYuXin13WuXinYing12(1.GuizhouProvinceKeyLabatyofFermentationEngineeringBiopharmacy

3、GuiyangGuizhou550003China)(2.ChemicalEngineeringCollegeofGuizhouUniversityGuiyangGuizhou550003China)(3.LifeScienceCollegeofGuizhouUniversityGuiyangGuizhou550000China)Abstract:Accdingtothecomparativeresearchofconventional

4、sterilefermentationuncookedmaterialfermentationtheconditionsoftannaseproductionfromAspergillusNigerB0201undersolidstatefermentationusinggallnutwasstudied.Theresultsshowedthattheliquid?solidratioof1.6:1temperatureof30Cini

5、tialpHof6.0weretheoptimalconditionsftannaseproductionunderuncookedmaterialfermentationwithgallnutcontentof20%(NH4)2SO4fnitrogensources.Underthisconditiontannaseactivityreachedto51.2Ugdsafter96hofcultivationwhichwas3.6tim

6、esastheconventionalsterilefermentation.Theresultsaboverevealedthatunderuncookedmaterialfermentationftannaseproductionwasafeasible種高效可行的產(chǎn)單寧酶的方法。1材料與方法1.1材料1.1.1菌種:黑曲霉B0201(Aspergillusniger)由貴州省發(fā)酵工程與生物制藥重點實驗室紫外誘變原始黑曲霉菌株篩選出

7、來菌種在4C條件下保存在馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基上。1.1.2基礎發(fā)酵培養(yǎng)基:稱取五倍子粉和麩皮共5.0g裝入250mL的三角瓶作為培養(yǎng)基基礎其中五倍子含量為8%加入1%(WW)NH4NO30.1%(WW)MgSO47H2O0.1%(WW)NaCl5mL蒸餾水攪拌均勻。1.1.3主要儀器與設備:UV2550紫外可見分光光度計恒溫培養(yǎng)箱。1.1.4主要試劑:沒食子酸丙酯購于湖南省張家界貿(mào)源化工有限公司繞單寧由上海君創(chuàng)化工有限公司生產(chǎn)五倍

8、子產(chǎn)于貴州省遵義市余慶縣試劑均為化學純。1.2方法1.2.1固體發(fā)酵方法:1)常規(guī)滅菌發(fā)酵?；A發(fā)酵培養(yǎng)基配好后于1105Pa高壓蒸汽滅菌20min冷卻后在5g培養(yǎng)基中接種1mL黑曲霉B0201孢子懸液(1108個孢子mL)混勻后置于30C培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)96h。2)生料發(fā)酵。基礎發(fā)酵培養(yǎng)基配好后不經(jīng)高壓蒸汽滅菌直接在5g培養(yǎng)基中接種1mL黑曲霉B0201孢子懸液(1108個孢子mL)混勻后置于30C培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)96h。1.2.2粗