銀耳多糖的提取純化、理化性質(zhì)及抗氧化活性研究.pdf

1、本研究以福建古田所產(chǎn)銀耳干樣為實驗材料，采用超聲波-熱水浸提、乙醇沉淀、Sevage+HCl法脫蛋白、超純水透析、DEAE-52纖維素離子交換層析以及SephadexG200凝膠過濾層析，分離純化得到三種均一的銀耳多糖TF-PA、TF-PB、TF-PC，分別對其進行理化性質(zhì)及抗氧化活性測定。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)通過響應(yīng)面分析法優(yōu)化，確定了水提法提取銀耳多糖的最佳提取條件:提取時間為3.8h、提取溫度為92℃、料液比為1∶

2、43。
　　(2)通過單因素試驗，得出Sevage法脫蛋白的最佳操作參數(shù)并篩選得到最佳處理方法:在振蕩時間1.5h、試劑添加比例為溶液的1/2、氯仿與正丁醇比例為4∶1、處理次數(shù)為1次的條件下進行sevage處理，再輔以24h的HCl處理，其蛋白脫除率提高為79.82％，多糖損失率則為29.42％。
　　(3)通過分離純化得到的三種多糖中，TF-PA為淡黃色晶體，TF-PB與TF-PC均為疏松的白色絮狀物;三者均無味，易吸濕

3、，易溶于水，不溶于有機溶劑，其高濃度水溶液呈粘稠狀。
　　(4)通過紅外光譜分析，發(fā)現(xiàn)三種多糖的圖譜中出現(xiàn)多處多糖的特征吸收峰，同時，結(jié)合顯色反應(yīng)證實TF-PC中含有葡萄糖醛酸。通過HPLC與GC-MS分析，TF-PA為5.34×105Da的中性雜多糖，主要由阿拉伯糖、甘露糖、木糖、葡萄糖和半乳糖組成，其摩爾比為1.39∶8.40∶3.81∶24.65∶1;TF-PB為7.08×105Da的酸性雜多糖;主要由阿拉伯糖、木糖、甘露糖

4、、葡萄糖、果糖和半乳糖組成，其摩爾比為1.24∶1∶2.28∶6.78∶1.58∶1.66; TF-PC為1.47×106Da的酸性雜多糖，主要由阿拉伯糖和葡萄糖組成，其摩爾比為1.05∶1。
　　(5)通過體外的自由基清除實驗表明，三種多糖均具有一定的抗氧化活性，但其對幾種自由基的清除效果均低于同等濃度的Vc溶液，其中又以TF-PA的清除效果最弱。1mg/mL的TF-PA、TF-PB、TF-PC水溶液，還原力大小依次為0.322