三丁基錫對雄性小鼠性腺發(fā)育的影響及其機(jī)制的初步研究.pdf

1、三丁基錫(TBT)是一種重要的有機(jī)錫類化合物，在環(huán)境中大量使用，具有很強(qiáng)的毒性。近年，許多研究表明TBT對軟體動(dòng)物和魚類生殖機(jī)能產(chǎn)生影響，但是有關(guān)對哺乳動(dòng)物的生殖影響報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)以青春期雄性小鼠為研究對象，在生態(tài)條件下和環(huán)境污染濃度范圍內(nèi)，采用不同濃度TBT(0.5、5、50μg/kg)對其進(jìn)行灌胃染毒，每三天灌胃一次，暴露30天。通過光學(xué)顯微鏡觀察精子質(zhì)量；放射免疫法檢測睪丸性激素水平；westernblotting方法檢測性激素

2、受體水平以及PCNA表達(dá)水平；并利用TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡情況，最終分析TBT對雄性小鼠性腺發(fā)育的影響及其作用機(jī)理。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1．TBT暴露30天后，青春期雄性小鼠體重沒有出現(xiàn)顯著變化，性腺指數(shù)呈劑量—依賴性下降，高濃度組出現(xiàn)顯著性差異。組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)低濃度組和中濃度組曲細(xì)精管內(nèi)細(xì)胞少量脫落，而高濃度組管內(nèi)細(xì)胞層數(shù)則大幅減少，精細(xì)胞脫落，分布散亂； 2．TBT暴露影響了小鼠精子發(fā)生，通過對小鼠附睪精子質(zhì)

3、量的檢測，結(jié)果表明附睪中的精子數(shù)量和精子存活率與對照組相比都有顯著性下降，中濃度組和高濃度組的畸形率顯著上升，且都呈劑量一效應(yīng)關(guān)系； 3．TBT暴露30天后，免疫組化等方法發(fā)現(xiàn)TBT降低PCNA在精細(xì)胞中的表達(dá)水平，表現(xiàn)出劑量—效應(yīng)性關(guān)系，其中中濃度和高濃度與對照組相比都有顯著性差異；TUNEL實(shí)驗(yàn)顯示TBT暴露能夠誘導(dǎo)睪丸細(xì)胞的凋亡，且凋亡主要發(fā)生在精原細(xì)胞和精母細(xì)胞中，也呈劑量—效應(yīng)關(guān)系； 4．TBT暴露后小鼠睪丸中

4、睪酮水平?jīng)]有顯著變化，但17β—雌二醇水平卻呈劑量—依賴性下降，其中50μg/kg組的17β—雌二醇水平與對照組相比有顯著性差異，同時(shí)westernblotting還顯示在5μg/kg和50μg/kg暴露組中，TBT顯著抑制睪丸雌激素受體(ER-α和ER-β)的水平，提高小鼠睪丸中雄激素受體(AR)的表達(dá)，并都呈劑量-效應(yīng)性關(guān)系。 綜上所述，低劑量的TBT暴露能夠抑制雄性小鼠性腺的發(fā)育，影響精子的發(fā)生。同時(shí)，TBT使睪丸中17β