血管內皮細胞損傷的實時監(jiān)測及藥物保護研究.pdf

1、細胞是生物體基本結構和功能的單位，細胞研究是征服疾病和揭示生命奧秘的基礎環(huán)節(jié)之一。本文針對體外培養(yǎng)的細胞，利用壓電傳感技術和電化學方法等，開展了在不同的界面上對細胞的粘附、生長、增殖、損傷等細胞行為和形態(tài)變化的研究。
　　本研究主要內容包括：⑴將半胱氨酸與甲硫氨酸分別修飾在QCM金電極上，構建兩種不同的電極表面:親水性電極表面和疏水性電極表面。以修飾電極為工作電極，利用循環(huán)伏安法(CV)和交流阻抗技術(EIS)，結合顯微鏡觀察結果

2、和MTT實驗分別對不同電極表面人臍靜脈血管內皮細胞HUVEC-C的粘附生長及H2O2誘導的氧化損傷結果進行了研究。結果表明:親水性電極表面有利于促進細胞的粘附和增殖，而疏水性電極表面對細胞的粘附生長有一定的抑制作用。過氧化氫的強氧化性導致貼壁細胞發(fā)生嚴重的氧化損傷。相對于親水性電極表面，疏水性電極表面的細胞的損傷程度更大，這與甲硫氨酸修飾電極表面細胞的粘附生長狀況較差有關。⑵通過電化學聚合賴氨酸和滴干石墨烯量子點(GQDs)制備了聚賴氨

3、酸(PLL)和GQDs修飾的玻碳電極GCE/PLL/GQDs，利用循環(huán)伏安法研究了槲皮素在該修飾電極上的電化學行為。實驗結果表明，賴氨酸聚合圈數為100圈、靜置時間為200 s、B-R緩沖液pH值為6.0時峰電流最大。利用差分脈沖伏安法(DPV)對不同濃度的槲皮素開展了電化學檢測，DPV氧化峰峰電流與槲皮素的濃度在0.05μM～5.0μM范圍內呈良好的線性關系。該修飾電極成功用于銀杏達莫注射液中槲皮素含量的分析，回收率較高。⑶使用石英晶

4、體微天平(QCM)實時監(jiān)測人臍帶靜脈內皮細胞(HUVEC-C)在金電極上的粘附、鋪展和增殖過程。細胞的正常粘附行為引起的粘密度效應導致諧振頻率的降低和動態(tài)電阻的增加。加入H2O2后HUVEC-C細胞的氧化損傷引發(fā)細胞鋪展面積和電極表面細胞覆蓋度的下降，導致QCM響應信號的逆轉。研究表明，細胞的損傷程度與H2O2的濃度有關，預先在培養(yǎng)基中加入的0.05 mM槲皮素可以完全消除1.0 mM H2O2氧化作用的影響。當2.5 mM H2O2誘