中國對(duì)蝦(Fenneropenaeus chinensis)主要過敏原的鑒定與分析.pdf

1、浙江工商大學(xué)研究生論文DissertationSubmittedtoZhejiangGongshangUniVersityforMaster’sDegreeofEngineeringIdentificationandanalysisofm句oralergensinchineseshrimp，F(xiàn)enneropenc【e銳schinensisAuthor：YayunLiangMajor：FoodScienceandEngineeringSu

2、peI、risor：ProfLinglinFu浙鱸z角矢乎ZHEJlANGGONGSHANGUNlV蘭RSlTYDec2015CollegeofFoodScienceandBiotechnologyEngineering，ZhejiangGongshangUniVers時(shí)Hangzhou，31OO18，PRChina浙江工商大學(xué)研究生論文行Mascot數(shù)據(jù)庫搜庫，得到兩種不同的蛋白，分別為402kDa，等電點(diǎn)分別為6O和62的精氨酸激酶

3、和分子量為358kDa，等電點(diǎn)為46的原肌球蛋白，并得到這兩種蛋白的氨基酸序列。經(jīng)過與其他物種的過敏蛋白的氨基酸序列對(duì)比，發(fā)現(xiàn)這兩種蛋白分別與甲殼類動(dòng)物的精氨酸激酶和原肌球蛋白的同源性高達(dá)95％以上，說明實(shí)驗(yàn)鑒定的中國對(duì)蝦中的精氨酸激酶和原肌球蛋白是引起過敏的過敏原，而分析得到的兩種不同等電點(diǎn)的精氨酸激酶，認(rèn)為可能存在不同蛋白質(zhì)修飾的同工酶，造成其存在等電點(diǎn)不同的蛋白點(diǎn)；3采用鹽析的方法將中國對(duì)蝦中的原肌球蛋白分離出來，將其純化得到純度

4、較高的原肌球蛋白，通過SDSPAGE和質(zhì)譜鑒定，發(fā)現(xiàn)電泳圖中主要為36kDa的蛋白條帶，純度為95％以上，質(zhì)譜鑒定出這與之前鑒定出來的原肌球蛋白相似度達(dá)到90％。最后用過體外細(xì)胞致敏模型對(duì)其性質(zhì)進(jìn)行分析。經(jīng)過溫度、pH等條件的變化，并模擬胃腸道消化后，在P815肥大瘤細(xì)胞模型中分析其活性，發(fā)現(xiàn)原肌球蛋白是一種耐熱、耐酸的蛋白，能一定程度上被胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶降解，降低其致敏性，但不能完全使其失去活性。關(guān)鍵詞：中國對(duì)蝦；雙向