楊梅主要過(guò)敏原分離純化以及免疫活性鑒定.pdf

1、對(duì)于大多數(shù)人來(lái)講，水果是一種健康食品，但有一部分人由于自身遺傳以及生活環(huán)境等因素，對(duì)某一種或者多種水果過(guò)敏。這種現(xiàn)象伴隨水果生產(chǎn)專業(yè)化以及銷售網(wǎng)絡(luò)全球化以及消費(fèi)水果種類和數(shù)量的增加而更為普遍。水果過(guò)敏是患者的免疫系統(tǒng)發(fā)生紊亂而導(dǎo)致的，它主要是由于某些蛋白成分（過(guò)敏原）所引起的，一般屬于Ⅰ型超敏反應(yīng)（typeⅠ hypersensitivity），約1-3％的人群受到此類型疾病所困擾。因此，開展水果的過(guò)敏原研究對(duì)保護(hù)人們的生命健康、提高人

2、民生活質(zhì)量具有巨大的經(jīng)濟(jì)效益以及社會(huì)效益。本論文主要是從楊梅過(guò)敏原蛋白的分離純化以及純化產(chǎn)物的免疫學(xué)活性分析等方面進(jìn)行研究，得到如下結(jié)論:
　　首先，應(yīng)用Coca，s提取法提取楊梅果實(shí)中粗蛋白液，運(yùn)用還原SDS-PAGE技術(shù)對(duì)楊梅粗提蛋白液進(jìn)行初步分析，顯示楊梅粗提蛋白中包含以前用過(guò)敏血清免疫印跡實(shí)驗(yàn)鑒定為28 kDa的主要過(guò)敏原蛋白條帶。
　　其次，通過(guò)超濾離心法、SP-FF離子交換層析以及Superdex7510/300

3、 GL凝膠柱層析方法分別純化楊梅主要過(guò)敏蛋白。依據(jù)楊梅轉(zhuǎn)錄組推導(dǎo)的氨基酸數(shù)據(jù)，對(duì)楊梅主要過(guò)敏蛋白進(jìn)行肽段指紋圖譜、分子量質(zhì)譜測(cè)定以及酶聯(lián)免疫(ELISA)間接法分析與鑒定，得到楊梅主要過(guò)敏原理論分子量和質(zhì)譜檢測(cè)所得分子量一致，ELISA檢測(cè)后有很強(qiáng)的免疫活性，且肽段指紋圖譜匹配實(shí)驗(yàn)與氨基酸序列比對(duì)得出楊梅主要過(guò)敏蛋白屬于幾丁質(zhì)酶第三家族(classⅢ chitinase)(已提交至NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)，序列號(hào):KP307670)。