VIP在煙曲霉菌感染角膜中的表達(dá)及作用.pdf

1、目的：研究血管活性腸肽（Vasoactive intestinal peptide，VIP）在易感型C57BL/6小鼠和抵抗型BALB/c小鼠煙曲霉菌感染角膜中的表達(dá)，明確VIP在BALB/c小鼠煙曲霉菌感染性角膜炎中的作用。
　　方法:(1)實(shí)驗(yàn)用抵抗型BALB/c及易感型C57BL/6兩種類型的小鼠。用煙曲霉菌感染小鼠角膜，建立小鼠真菌性角膜炎動(dòng)物模型，采用RT-PCR技術(shù)方法檢測(cè)兩種小鼠正常角膜和煙曲霉菌感染后分別于第1天、

2、3天、5天角膜中VIP mRNA的表達(dá)情況。(2)選用抵抗型BALB/c小鼠作為接下來(lái)實(shí)驗(yàn)用的動(dòng)物模型。給予BALB/c小鼠VIP拮抗劑預(yù)處理，用可拍照的裂隙燈顯微鏡定期觀察小鼠角膜感染情況，分別于感染的第1天，3天和第5天根據(jù)小鼠角膜的感染情況進(jìn)行臨床評(píng)分。利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)預(yù)處理前后正常角膜和感染后第3天小鼠角膜中促炎細(xì)胞因子MIP-2、IL-1β、TNF-α以及抗炎細(xì)胞因子IL-10、TGF-βmRNA的表達(dá)；利用ELISA

3、技術(shù)檢測(cè)小鼠正常角膜和煙曲霉菌感染后第3天及第5天角膜中促炎因子MIP-2、IL-1β、TNF-α蛋白和抗炎細(xì)胞因子IL-10及TGF-β蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：（1）BALB/c小鼠角膜在煙曲霉菌感染后第1天和第3天VIP mRNA的表達(dá)明顯高于C57BL/6小鼠煙曲霉菌感染角膜中的表達(dá)，而在煙曲霉菌感染角膜后的第5天，兩種類型小鼠的角膜中VIP mRNA的表達(dá)未見明顯差異。正常兩種小鼠角膜中也可見VIP的表達(dá)。（2）BAL

4、B/c小鼠經(jīng)VIP拮抗劑處理后，與PBS處理對(duì)照組相比，VIP拮抗劑預(yù)處理小鼠角膜，在煙曲霉菌感染后的第3天和第5天可以增加小鼠角膜中炎癥細(xì)胞因子MIP-2、IL-1β、TNF-αmRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)，明顯降低小鼠角膜中抗炎細(xì)胞因子IL-10、TGF-βmRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。BALB/c小鼠角膜的炎癥反應(yīng)加重，真菌感染性角膜炎的臨床評(píng)分升高。
　　結(jié)論：(1)煙曲霉菌感染性角膜炎中，抵抗型BALB/c小鼠VIP的表達(dá)明顯高