轉(zhuǎn)錄因子pu.1在煙曲霉感染中的天然免疫作用和機(jī)制研究

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 3 級(jí)碩士學(xué)位論文轉(zhuǎn)錄因子P U ．1 在煙曲霉感染中的天然免疫作用和機(jī)制研究I n n a t ei m m u n e f u n c t i o n a n dm e c h a n i s m o f t r a n s c r i p t i o nf a c t o rP U ．1i n A s p e r g i l l u sf u m i g a t u s i n f e c t i o n課

2、題來源：國(guó)家科學(xué)自然基金( 8 1 2 7 0 0 6 4 )學(xué)位申請(qǐng)人 劉晨陽導(dǎo) 師 姓 名 施毅教授專 業(yè) 名 稱 內(nèi)科學(xué)( 呼吸病學(xué))培 養(yǎng) 安 型 專業(yè)型培 養(yǎng) 層 次 碩士研究生所 在 學(xué) 院 第一臨床分委會(huì)南京軍區(qū)南京總醫(yī)院答辯委員會(huì)主席 林勇 教授答辯委員會(huì)委員 周賢梅教授周國(guó)華教授谷偉教授蔡后榮教授年 月 日廣州摘要噬細(xì)胞吞噬和殺滅入侵的煙曲霉孢子，釋放促炎因子和趨化因子等，并進(jìn)一步激活宿主的適應(yīng)性免疫反應(yīng)，增強(qiáng)宿主對(duì)入

3、侵煙曲霉的殺滅和清除能力。研究證實(shí)，無論在人類還是小鼠，D e c t i n ．1 、T L R - 2 和T L R ．4 基因沉默或敲除后，宿主對(duì)煙曲霉的易感性明顯升高，并且具有較低的炎癥因子水平和較高的組織真菌負(fù)荷，而基因敲除的小鼠死亡率也明顯升高。因此，D e c t i n ．1 、T L R - 2 和T L R - 4 在抗煙曲霉天然免疫反應(yīng)中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。轉(zhuǎn)錄因子P U ．1 是E T S ( E 2 6 ．t

4、 r a n s f o r m a t i o n ．s p e c i f i c ) 家族的重要成員之一，對(duì)于人類，它主要由脾病灶形成病毒前病毒整合癌基因．1 ( s p l e e nf o c u sf o r m i n gv i r u sp r o v i r a li n t e g r a t i o no n c o g e n e - 1 ，S P l l ) 基因編碼。研究發(fā)現(xiàn)，P u 。l 的主要功能是參與造

5、血系統(tǒng)的分化和發(fā)育。但越來越多的研究證實(shí)，P U ．1 能夠參與宿主天然免疫和適應(yīng)性免疫反應(yīng)。在成熟的巨噬細(xì)胞中，P U ．1 能夠結(jié)合某些重要基因的啟動(dòng)子區(qū)域，在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控它們的表達(dá)，包括D e c t i n ．1 、T L R - 2 和T L R - 4 ，但是在翻譯水平和他們的功能方面研究較少。因此，鑒于D e c t i n - 1 、T L R ．2 和T L R - 4 在煙曲霉感染中的重要作用和P U ．1 對(duì)它們的

6、調(diào)控作用，我們?cè)O(shè)想，高表達(dá)或沉默P U ．1 能夠影響宿主細(xì)胞抗煙曲霉感染的天然免疫作用。本研究使用人急性單核細(xì)胞白血病單核細(xì)胞株( h u m a n a c u t e m o n o c y t i el e u k e m i a c e l l l i n e ，T H P ．1 ) 經(jīng)佛波酯( p h o r b o l m y r i s t a t ea c e t a t e ，P M A ) 誘導(dǎo)貼壁，獲得了體外A

7、M s細(xì)胞模型T H P ．1 巨噬細(xì)胞。并通過P U ．1 基因重組腺病毒( r e c o m b i n a n t a d e n o v i r u s ，A d - P U ．1 ) 和P U ．1 小干擾R N A ( s m a l l i n t e r f e r i n g R N A ，P U ．1s i R N A ) 成功構(gòu)建了P U ．1 高表達(dá)和沉默的T H P ．1 巨噬細(xì)胞模型，并進(jìn)一步驗(yàn)證了干預(yù)P