共振瑞利散射法用于酸性粘多糖的測(cè)定.pdf

1、近年來，多糖分子因具有廣泛的生物學(xué)活性而備受關(guān)注。酸性粘多糖在食品、醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域都有很大的應(yīng)用價(jià)值，因此研究與檢測(cè)酸性粘多糖具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。共振瑞利散射(RRS)技術(shù)因靈敏度高、儀器簡單等優(yōu)點(diǎn)而引起了國內(nèi)外研究者的極大興趣和廣泛關(guān)注，近十幾年來該技術(shù)發(fā)展迅速，已成功應(yīng)用于生物大分子和痕量金屬、非金屬以及有機(jī)物的測(cè)定。本文以共振瑞利散射光譜技術(shù)為研究手段，對(duì)三種酸性粘多糖(透明質(zhì)酸鈉、肝素鈉和硫酸葡聚糖鈉)與結(jié)晶紫、二安替比林甲

2、烷和金納米的相互作用進(jìn)行了研究，探討了反應(yīng)機(jī)理，提出了三波長疊加共振瑞利散射光譜法，并應(yīng)用于樣品分析。主要研究內(nèi)容如下： 1.結(jié)晶紫與透明質(zhì)酸鈉相互作用的共振瑞利散射光譜及其應(yīng)用研究在pH為4.2的酸性介質(zhì)中，透明質(zhì)酸鈉(SH)和結(jié)晶紫(CV)單獨(dú)存在時(shí)RRS強(qiáng)度都很弱，但是當(dāng)兩者相互作用形成離子締合物時(shí)，RRS強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，最大RRS峰波長位于715nm。我們研究了體系的RRS光譜特征、適宜的反應(yīng)條件，建立了快速、準(zhǔn)確測(cè)定S

3、H的方法。方法的線性方程為△I=202.1+206.8C(μg/mL)，線性范圍是0.2～40μg/mL，檢出限(36)為15 ng/mL。該方法用于樣品中透明質(zhì)酸鈉含量的測(cè)定，結(jié)果滿意。 2.結(jié)晶紫三波長疊加共振瑞利散射法測(cè)定硫酸葡聚糖鈉研究了用結(jié)晶紫三波長疊加共振瑞利散射法(TWO-RRS)測(cè)定硫酸葡聚糖鈉(DSS)的方法。在pH為10的BR緩沖溶液中，CV和DSS發(fā)生反應(yīng)引起共振瑞利散射急劇增強(qiáng)，出現(xiàn)的三個(gè)強(qiáng)峰分別位于3

4、40，501和671 nm處。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，方法的線性范圍是0.04～2.5 μg/mL。在三個(gè)單峰處的檢出限分別是24，27，和27 ng/mL，而三波長疊加后的檢出限是13ng/mL。三波長疊加共振瑞利散射法與傳統(tǒng)的單波長法相比具有更好的適應(yīng)性及更高的靈敏度。 3.二安替比林甲烷共振瑞利散射法測(cè)定硫酸葡聚糖鈉在HAc-NaAc緩沖介質(zhì)中，二安替比林甲烷(DAM)與硫酸葡聚糖鈉(DSS)相互作用生成的結(jié)合產(chǎn)物聚集成較大的

5、聚合體，引起共振瑞利散射強(qiáng)度急劇增大，同時(shí)出現(xiàn)新的散射峰。我們研究了體系的最佳反應(yīng)條件及影響因素，建立了一種測(cè)定DSS的新方法。方法的檢出限為17 ng/mL，線性范圍是0.05～2.5μg/mL。 4.金納米與硫酸葡聚糖鈉相互作用的共振瑞利散射光譜研究。用一種新型金納米(GNP)探針共振瑞利散射法測(cè)定了硫酸葡聚糖鈉(DSS)。在HAc-NaAc緩沖介質(zhì)中，GNP與DSS相互作用并引起共振瑞利散射強(qiáng)度急劇增大，同時(shí)出現(xiàn)新的散射

6、峰位于332 nm處。研究了體系的反應(yīng)條件及影響因素，在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，散射強(qiáng)度在0.01～2.5μg/mL的范圍內(nèi)與DSS的濃度成正比，方法的檢出限為1.85 ng/mL。 5.金納米與肝素鈉相互作用的共振瑞利散射光譜研究提出了一種用金納米(GNP)共振瑞利散射法測(cè)定肝素(Hep)的新方法，研究發(fā)現(xiàn)，在pH為4.7的HAc-NaAc緩沖溶液中，GNP和Hep通過靜電和疏水作用迅速地結(jié)合成(GNP-Hep)聚合物，并引起體系的RRS強(qiáng)度