擬南芥對草酸脅迫的生理響應及草酸抗性突變體的初步篩選.pdf

1、許多植物病原菌可以分泌草酸，草酸作為致病的關鍵因子在病原菌的侵染過程中發(fā)揮著重要作用，并與病原菌的致病性、毒性有密切關系。本研究以野生型擬南芥為材料，研究了在不同濃度、時間草酸脅迫條件下擬南芥的生理響應，并利用2.0 mmol·L-1草酸(oxalic acid，OA)從擬南芥激發(fā)標簽突變體庫中篩選草酸抗性增強突變體。本研究主要結果如下： 1.外源草酸引起了擬南芥葉片關活性氧代謝的變化，主要表現(xiàn)為誘導了擬南芥葉片SOD和PAL的

2、活性，使GSH含量增加，同時也抑制了CAT和POD活性，引起活性氧自由基的積累和膜脂過氧化，導致MDA的累積。 2.20～25mmol·L-1 OA可能是擬南芥對草酸脅迫下維持活性氧自由基產生與清除平衡的閾值。超過這個閾值后，SOD及PAL活性由誘導變成抑制，CAT活性急劇下降。 3.在30mmol·L-1草酸作用下，擬南芥葉片中SOD活性最先受到誘導，將O2-·歧化為了H2O2，但緊接著清除H2O2的POD、CAT和G

3、SH相繼受到了抑制，H2O2開始大量積累，在24h后導致了MDA含量的急劇增加。雖然GSH在24h后恢復了活性，但也并沒能及時清除H2O2。因此，外源草酸對POD和CAT的活性的抑制，或許就是其造成擬南芥葉片細胞傷害的重要原因。 4.篩選突變體是研究基因功能的重要手段，本研究確定了擬南芥激活標簽突變體庫草酸突變體的篩選壓為2.0 mmol·L-1，并對約5000株獨立的突變體并經過兩輪篩選獲得了草酸抗性增強突變體14株，并利用3